[发明专利]一种香蕉组培苗种源的低温保存方法

说明书

技术领域：

本发明涉及植物组织培养方法，具体涉及一种香蕉组培苗种源的低温保存方法。

背景技术：

我国是香蕉主产国之一，也是世界上栽培香蕉历史最悠久的国家之一，我国香蕉的品种资源十分丰富，对世界的香蕉产业作出了重大贡献。我国人口众多，香蕉消费量巨大，但目前每年每人香蕉消耗量平均不足4kg，随着交通运输、香蕉保鲜技术的改善及人民生活水平的提高，香蕉的需求量仍会大大增加，我国的香蕉的生产规模也必然会继续扩大。为提高我国香蕉产业的竞争力，发展其相关的高新生物技术并加以推广和应用十分迫切和必要。

香蕉组培苗的成功推广和周年栽培技术的应用，使种植香蕉比种植水稻等其他作物的效益高，取得了明显的经济和社会的效益，达到了香蕉高产、优质、高效的目的。我国香蕉生产已基本上实现了种植品种的良种化，种苗生产的工厂化。目前国内香蕉种植的良种覆盖率已达90％以上，通过香蕉组培育苗技术，培育出大量优质无病毒、生长整齐的香蕉试管苗代替了传统的吸芽苗，从而大幅度地提高了我国香蕉的生产水平。进一步有计划地引进品质好、产量高、抗逆性强的外来名优新品种，并通过组织培养进行种苗的规模化生产，实现区域化、标准化生产，可推进我国香蕉产业的快速发展。

但是，我国在香蕉组培苗的生产中存在着一些问题，如变异株的识别和控制、组培苗种源的保存、生产成本的控制、组培苗质量的稳定等方面。特别是在组培苗种源的保存方面极少见报道。由于香蕉种苗需求的季节性和不稳定性，有时种源大多，市场上不需要种苗时将会造成大量的浪费，而当市场上突然需要大量种苗时，又没有足够的种源可用于生产，因此，组培苗种源的保存在香蕉的规模化生产中有时会起到关键性的作用。在目前，国内外还没有香蕉组培苗种源保存的报道，也未见香蕉组培苗种源保存的专利申请。本发明采用独特的培养基和合适的培养温度和培养光照等培养条件进行香蕉组培苗种源的有效保存。

本实验中采用的香蕉材料有皇帝蕉、巴西蕉、粉蕉等。皇帝蕉(Musa paradisiaca AA)，原产印度尼西亚，是独特的食用二倍体(AA型)香蕉。在东南亚广为栽培，古时为泰国、越南进贡我国皇帝的佳果而又被称为贡蕉，在缅甸因其甜度高又称其为甜蕉。皇帝蕉果小，长约10厘米左右，无籽，皮薄、熟后皮金黄色，色泽鲜艳，外型美观，果肉橙黄、清甜芬芳、香甜可口，在我国一上市就十分畅销。皇帝蕉果实营养丰富，据报道，每100克可食部分含碳水化合物20克，蛋白质1.2克，脂肪0.6克，还含有多种维生素，是世界上公认的高档香蕉品种之一。巴西蕉(Musa AAA Giant Cavendish cv.Baxi)是我国目前生产规模最大的香蕉品种，基因型为AAA，产量高，果实品质好。而粉蕉(Musa ABB)是芭蕉属的杂交栽培种，又名西贡蕉、安南蕉和奶蕉等，其基因型是ABB，抗风、抗寒、抗旱能力较强，粉蕉果皮金黄，皮薄，果肉乳白色或浅橙色，口感嫩滑甜蜜，微香，可食率高，近年来在我国种植面积迅速扩大。

发明内容：

本发明的目的是提供一种保存成本低、操作简单、保存效果好的，能有效的对香蕉组培苗种源进行保存的方法，利用该方法可以先对香蕉组培苗种源进行保存，当需要进行香蕉种苗大规模生长时，可以将该低温保存的香蕉组培苗种源经种源恢复生长、继代增殖和生根培养后，在短时间内获得大量的试管苗，为香蕉种苗的适时生产提供一条有效的途径。

本发明的香蕉组培苗种源的低温保存方法，包括以下步骤：

(1)种源的低温保存：将香蕉通过组织培养获得的丛生芽切割后接种到低温保存培养基中，培养温度为14～18℃，培养光照为500～800lx，光照时间6～10小时/天，所述的低温保存培养基为每升培养基含有6-苄氨基腺嘌呤0.1～0.5mg、丁酰肼60～90mg，蔗糖10～20g、琼脂6～7g、余量为1/2MS，pH 5.5～5.8，由此而保存了香蕉组培苗的种源；继代周期为3～4个月，保存过程中有时会有少量根产生，每周期的增殖系数为1.8～2.2。

(2)种源的恢复生长：将低温保存的组培苗种源切割后接种到恢复生长培养基中，8～10天种源能恢复正常生长，30～35天时，将恢复正常生长的种源接种到新的恢复生长培养基中进行增殖快繁获得丛生芽，增殖倍数可达2.5～3倍，培养条件：培养温度25～30℃，光照度1500～2000lx，光照时间12～16小时/天，所述的恢复生长培养基为每升培养基含有6-苄氨基腺嘌呤3～5mg、吲哚丁酸0.2～0.5mg、蔗糖20～30g、琼脂6～7g、余量为MS，pH 5.5～5.8；丛生芽经常规生根培养获得试管苗。

试管苗经常规移植、炼苗后获得栽培苗，栽培苗可用于生产栽培。