[发明专利]重组人血管内皮抑制素缓释注射油制剂及其制备工艺

说明书

本申请系申请日为2007年11月8日、申请号为200710135101.X、发明名称为“重组人血管内皮抑制素缓释注射油制剂及其制备工艺”的发明专利申请的分案申请。

 

技术领域

本发明属于药物制剂技术领域，确切的说是将一具有抑制肿瘤血管生长活性的生物蛋白药物—重组人血管内皮抑制素（Endostar）制备成具有长效作用的缓释注射油制剂。本发明涉及到重组人血管内皮抑制素缓释注射油制剂及其制备工艺和使用方法。

背景技术

O’Reilly教授于1997年从小鼠内皮细胞系EOMAD的培养液中分离得到的一种具有抑制血管内皮细胞生长的物质（血管内皮抑制素，Endostatin），其通过抑制肿瘤血管的生成能够显著地抑制多种原发性肿瘤的生长。但是，由于血管内皮抑制素难以大规模进行复性因而无法真正应用于大规模生产，为此罗永章教授等人通过修饰人血管内皮抑制素的核苷酸编码序列，生产出N末端带有9个附加氨基酸序列的重组人血管内皮抑制素——Endostar，大大简化了纯化步骤，提高了产物的纯度（ZL 00107569.1），并成功解决了大规模复性的问题。Endostar由192个氨基酸构成，分子量为21kDa，其生物活性与血管内皮抑制素（Endostatin）完全相同，并且没有因为附加N端序列而导致体内免疫原性。目前， Endostar已经中国国家药品食品监督管理局批准为一类新药而获准销售，成为全世界独家上市的重组人血管内皮抑制素产品。目前市场上销售的重组人血管内皮抑制素为普通注射液，商品名为：恩度；规格为15mg/3ml/支，临床使用中患者需每天注射一次，连续14天为一个疗程，休息一周后，再继续下一疗程。由于频繁的注射给药，在生理上给患者带来了巨大的痛苦，同时给患者带来了巨大的经济压力，因此，将其开发成注射一次可以持续释药多日的长效制剂非常必要。

目前将半衰期短，分子量大，质量不稳定的蛋白药物或多肽药物制成长效制剂通常采用将药物制成缓释微球的形式，通过组成微球的聚合物材料在体内的缓慢降解从而达到药物在体内缓慢释放、吸收的目的，但由于缓释微球的制备技术难度较高，工艺复杂，对制备微球所需材料的质量要求极高，且价格昂贵不易获得，因而在实际的开发过程中面临着诸多困难。

发明内容

本发明目的是克服上述制剂的不足之处，研制一种重组人血管内皮抑制素的缓释长效制剂。

本发明提供了含重组人血管内皮抑制素的缓释注射油制剂及其制备工艺和使用方法，目的在于克服目前临床上使用的重组人血管内皮抑制素普通注射液一天给药一次，患者需要天天注射给药的缺点。

本发明的制剂所含的活性成分为重组人血管内皮抑制素，优选Endostar。Endostar的分子量为21kDa，由192个氨基酸构成，氨基酸序列为：

MGGSHHHHH HSHRDFQPVLHLVALNSPLSGGMRGIRGADFQCFQQARAVGLAGTFRAFLSSRLQDLYSIVRRADRAAVPIVNLKDELLFPSWEALFSGSEGPLKPGA

本发明中的油制剂包括油混悬剂、油包水型乳剂和油溶液剂，其主要特征是以注射用油为主要溶媒，通过混悬法、乳化法、冻干复溶法等不同方法将重组人血管内皮抑制素均匀分散在油性溶媒中，形成油状混悬液或油包水型乳液或油状溶液，其皮下或肌内注射后能自动形成油性药物贮库，延缓重组人血管内皮抑制素的释放，用于肿瘤方面的持续治疗。

本发明中的油混悬剂其处方组成为：按重量体积比每100ml油混悬剂含有0.5～10g的重组人血管内皮抑制素，0～5g的单硬脂酸盐，其余为注射用油。单硬脂酸盐包括单硬脂酸铝、单硬脂酸镁、单硬脂酸锌等盐；注射用油包括芝麻油、大豆油、蓖麻油、花生油、甘油单酯、甘油二酯、甘油三酯、橄榄油、中链油、鱼油等。

本发明中的油包水型乳剂其处方组成为：按重量体积比每100ml油包水型乳剂中含有0.5～10g的重组人血管内皮抑制素、0.2～5g表面活性剂，0～5g的单硬脂酸盐，5～40g的水，其余为注射用油。单硬脂酸盐包括单硬脂酸铝、单硬脂酸镁、单硬脂酸锌等盐；表面活性剂包括卵磷酯、司盘、脂肪酸甘油脂、吐温和泊洛沙姆等；注射用油包括芝麻油、大豆油、蓖麻油、花生油、甘油单酯、甘油二酯、甘油三酯、橄榄油、中链油、鱼油等。