[发明专利]固定化多酚氧化酶动态连续氧化制备茶黄素的方法

权利要求书

1.固定化多酚氧化酶动态连续氧化制备茶黄素的方法，其具体步骤如下：1)以树脂作为载体，采用吸附交联法将多酚氧化酶固定在树脂上，制得固定化多酚氧化酶；2)将茶多酚用溶剂溶解配制成底物料液，所述底物料液的浓度控制在5-15mg/mL，茶多酚中的儿茶素总量≥30％；3)将固定化多酚氧化酶固定于填充床反应器中形成床体，从填充反应器的底部将氧气与底物料液同时通入床体中，进行茶多酚的动态连续氧化，使儿茶素聚合形成茶黄素；4)通过恒流泵从填充床反应器上端将反应生成液连续泵出，得到茶黄素混合液；5)对茶黄素混合液进行浓缩、干燥，得到粗茶黄素产品。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于步骤3)氧化反应的条件为：当柱床体积为100mL时，填充床反应器内的反应温度控制在10-50℃，氧气流量控制在10-100mL/min，底物料液流速控制在1.0-5mL/min，反应生成液泵出的流速为底物料液流速的1-1.2倍。

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于以98％含量的茶多酚为底物原料，底物料液的浓度控制在10mg/mL，填充床反应器内的反应温度控制在28℃，底物流速控制在2.0mL/min，氧气流量控制在50mL/min，反应生成液由恒流泵以2.0mL/min泵出。

4.根据权利要求2所述的方法，其特征在于所述的多酚氧化酶为真菌漆酶、植物果实多酚氧化酶、茶叶多酚氧化酶或酪氨酸酶。

5.根据权利要求2所述的方法，其特征在于所述的树脂为阳离子交换树脂、大孔吸附树脂或阴离子交换树脂。

6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于所述的树脂为阳离子交换树脂D152。

7.根据权利要求2所述的方法，其特征在于步骤2)中的溶剂为水、10-50％乙醇水溶液或pH值为3.2-7.3的磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液。

8.根据权利要求2所述的方法，其特征在于所述的填充床反应器为双层夹套柱，该填充床反应器的双层夹套内通水，通过水循环控制填充床反应器内的反应温度，所用的氧气为纯氧。

9.根据权利要求1所述的方法，其特征在于当进行茶黄素的放大反应时，氧气流量和底物流速根据放大倍数进行调节。

10.根据权利要求1所述的方法，其特征在于所述的填充床反应器内设有一位于床体上方的能升降的圆形活塞式挡板，活塞式挡板与填充床反应器内壁之间有用于反应生成液泵出的通道，该活塞式挡板通过一侧壁上开有多个孔的硬管与恒流泵连接。