[发明专利]抗骨桥蛋白嵌合抗体、其制备方法及其在制备治疗骨质疏松药物中的用途

说明书

技术领域

本发明属于生物制药领域，更具体地，本发明公开了一种嵌合抗体、其制备方法及其用途。

背景技术

骨质疏松症(Osteoporosis)是人类最为常见的一种代谢性骨病，其发病率已经跃居各种常见病的第七位。随着社会的发展，人口老龄化的趋势越来越明显，与之相应的原发性骨质疏松的发生率明显增高，尤其是骨质疏松性骨折发病率很高，甚至有一定的死亡率，给社会、家庭和个人带来巨大的经济负担。积极防治骨质疏松已成为老龄化社会卫生保健的突出问题。骨质疏松是以骨量减少，骨组织微细结构退化、破坏，导致骨的脆性增高和骨折危险性增加为特征的一种全身性骨髂疾病(1)。引起骨质疏松的原因较多，但其根本原因是破骨细胞数量增多、功能亢进，骨吸收速率超过骨形成。因此，治疗骨质疏松的策略大多为抑制破骨细胞。

骨桥蛋白(Osteopontin，OPN)，又称为早期T淋巴细胞活化因子I(Eta-1)或分泌型磷蛋白I，含有Arg-Gly-Asp(RGD，精氨酸一甘氨酸一天门冬氨酸)三肽序列，分子量根据去磷酸化及糖基化形式的不同大约为44-66KD之间，是一种重要的多功能细胞外基质蛋白(Eta-1(osteopontin)：an early component of type-1(cell-mediated)immunity.Science.2000.287：860-864)。OPN在骨组织细胞、巨噬细胞、活化的T细胞及上皮细胞等多种细胞上表达，在介导细胞的趋化、粘附、增殖和迁移，肿瘤转移，骨组织的矿化与重建，免疫调节，信号转导，以及对感染性疾病的免疫能力等方面有着重要的作用(Osteoprotegerin Ligand Is a Cytokine that Regulates Osteoclast Differentiation and Activation.Cell，1998.93：65-176.Osteopontin：role in cell signaling and cancer progression.TRENDS in Cell Biology 2006.16：79-87.)。OPN主要是通过RGD及非RGD两个途径与细胞表面的受体相结合而实现其功能(Inhibition of Arg-Gly-Asp(RGD)-mediated Cell Adhesion to osteopontin by a Monoclonal Antibody against osteopontin.J.Bio.Chem.1994.269：23280-23285)，RGD途径主要是与细胞表面的整合素受体(αγβ3、αγβ1、αγβ5)结合，而非RGD途径主要是与某些CD44的变异体(V6、V7)结合，从而介导细胞的多种生理功能(Intracellular Osteopontin Is an Integral Component of the CD44-ERM Complex Involved in Cell Migration.JOURNAL OF CELLULAR PHYSIOLOGY.2000：184：118-130)。总的说来，细胞所分泌的OPN经过磷酸化、糖基化，然后再经过凝血酶的剪切等一系列表达后修饰作用，以多种形式存在于机体中，每种形式可能有其独特的功能，但目前的研究还不能充分说明，有待进一步的研究与探讨。