[发明专利]犬钩虫抗凝肽及其突变体在制备溶血栓药物中的用途

说明书

技术领域

本发明涉及犬钩虫抗凝肽及其突变体的一种新的药理用途，尤其涉及犬钩虫抗凝肽及其突变体在制备溶血栓药物中的用途，属于犬钩虫抗凝肽及其突变体的药理用途领域。

背景技术

血栓性疾病包括心肌梗死、脑栓死、肺血栓和周围血管拴塞等，是严重危害人类健康和生命的疾病，其发病率、致残率和死亡率都很高。据世界卫生组织统计，世界每年死于血栓病人数约2600万，中国每年新血管病死亡者占因病死亡总人数的40.7％，其比例远高于癌症，居各类死因之首(桂清.血栓疾病已成为威胁人类健康和生命的重要疾病.中华检验医学杂志，2004，8(27)：487)。溶栓被认为是治疗血栓性疾病的重要方法之一。

犬钩虫抗凝肽5(Ancylostoma caninum anticoagulant peptide，AcAP₅)是从食血成年钩虫，犬钩口线虫(Ancylostoma caninum)可溶性提取物中分离出来的一种肽类FXa抑制剂，由77个氨基酸组成，分子量8.7KD，已获得其重组产物rAcAP5。AcAP₅是迄今为止报道的活性最强的多肽类FXa抑制剂，能够抑制动脉、静脉血栓的形成(United StatesPatent5,427,937、6,534,629 et al.)。在犬冠状动脉血栓模型中，仅皮下给药一次就可维持药效6小时，与其它蛋白类FXa抑制剂相比，AcAP₅的一个突出优点就是给药方便和作用持续时间长(Sam S.Rebello，HowardS.(2000)Thrombosis Research 98：531-540)。

公开号为CN101041690 A、发明名称为“重组犬钩虫抗凝肽5突变体、其编码基因、其制备和应用”的中国发明专利公开了一种重组犬钩虫抗凝肽5突变体(rAcAP₅m)，体内和体外的试验表明，所述的重组多肽rAcAP₅m与rAcAP5的抗血栓活性相当，有希望成为一类新型的治疗血栓栓塞性疾病的药物。

迄今为止，尚未有任何文献报道犬钩虫抗凝肽5及其突变体具有溶血栓活性，可应用于治疗血栓性疾病。

发明内容

本发明的主要目的是提供犬钩虫抗凝肽及其突变体的一种新的药理用途。

本发明的主要目的是通过以下技术方案来实现的：

本发明通过大量的药理实验发现，犬钩虫抗凝肽5(AcAP5)及其突变体(rAcAP₅m)在体外或体内均有优秀的溶血栓活性，其活性呈剂量依赖性，可将它们制备成治疗血栓性疾病的药物。

具体的，本发明发现犬钩虫抗凝肽5(rAcAP₅)及其突变体(rAcAP₅m)具有抑制凝血酶活化的纤溶抑制物(TAFI)的活性，且均可浓度依赖地抑制TAFI的活性，IC₅₀为6.37×10^-8M-7.23×10^-8M。

rAcAP5和其突变体rAcAP₅m可明显缩短纤溶时间，增强尿激酶的纤溶活性；rAcAP5及其突变体rAcAP₅m可明显促进尿激酶的体外溶栓作用，它们单独应用也有明显体外溶栓作用；rAcAP5及其突变体rAcAP₅m具有剂量依赖的体内溶栓作用。rAcAP5及其突变体rAcAP₅m对正常大鼠的优球蛋白溶解时间、血浆纤维蛋白原含量和血浆纤维蛋白(原)降解产物FDP都无影响，说明rAcAP5及其突变体rAcAP₅m只有在血栓形成时发挥溶栓作用，并不激活机体正常的纤溶系统，因此出血副作用可能较轻，表明犬钩虫抗凝肽5(rAcAP5)及其突变体(rAcAP₅m)的溶栓作用是源于它对凝血酶活化的纤溶抑制物(TAFI)的抑制作用。