[发明专利]一种石斑鱼虹彩病毒灭活疫苗的制备方法有效
| 申请号： | 201110110399.5 | 申请日： | 2011-04-29 |
| 公开（公告）号： | CN102178945A | 公开（公告）日： | 2011-09-14 |
| 发明（设计）人： | 秦启伟;欧阳征亮;汪沛然;黄晓红;黄友华 | 申请（专利权）人： | 中国科学院南海海洋研究所 |
| 主分类号： | A61K39/12 | 分类号： | A61K39/12;A61P31/20 |
| 代理公司： | 广州粤高专利商标代理有限公司 44102 | 代理人： | 陈卫 |
| 地址： | 510301 *** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 石斑鱼 虹彩 病毒 疫苗 制备 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种石斑鱼虹彩病毒灭活疫苗的制备方法，其特征在于包括以下步骤：①培养石斑鱼胚胎细胞，待细胞生长至对数期时接种石斑鱼虹彩病毒；②接种后的细胞病变完全后，反复冻融2-3次，去除细胞碎片，收集离心所得的含石斑鱼虹彩病毒的上清液；③调整含石斑鱼虹彩病毒的上清液pH值至7.4-7.6，加入β-丙内酯，病毒液与β-丙内酯混合均匀后4℃灭活处理16小时；其中病毒液与β-丙内酯体积比为1:500。
2.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于步骤①所述培养是将石斑鱼胚胎细胞用质量分数0.25%的胰蛋白酶消化1-2分钟后，加入新配置的pH7.4-7.6含8-10%胎牛血清的MEM培养液，于25-28℃进行培养扩增。
3.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于步骤①所述接种是用0.01-0.05MOI的石斑鱼虹彩病毒。
4.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于步骤②所述的去除细胞碎片是将病变细胞2500g离心10分钟。
5.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于步骤③石斑鱼虹彩病毒液用氢氧化钠溶液调pH值；所述病毒液是离心后收集的含石斑鱼虹彩病毒的上清液。
6.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于步骤③灭活过程中保持病毒液与β-丙内酯混合液的ph值在7.4-7.6之间。
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