[发明专利]vMIP-II蛋白的固相合成方法有效

专利信息
申请号: 201110112488.3 申请日: 2011-05-03
公开(公告)号: CN102241749A 公开(公告)日: 2011-11-16
发明(设计)人: 孙晗笑;莫雪梅;李秀英;张光 申请(专利权)人: 暨南大学
主分类号: C07K14/03 分类号: C07K14/03;C07K1/06;C07K1/04
代理公司: 广州粤高专利商标代理有限公司 44102 代理人: 陈卫
地址: 510632 广东*** 国省代码: 广东;44
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摘要:
搜索关键词: vmip ii 蛋白 相合 成方
【权利要求书】:

1.vMIP-II蛋白的固相合成方法,步骤如下:

(1)固相合成仪的反应瓶清洗后加入二甲基二氯硅烷,通风过夜使反应瓶硅烷化,清洗后在-80℃冷却反应瓶,再次清洗,烘干备用;

(2)称取Wang's树脂置于反应瓶中,加入3倍于树脂体积的DCM溶液,溶胀后排空液体,然后在多肽合成仪上按偶连氨基酸、茚三酮反应检测和α-氨基脱保护的循环从C端到N端进行,直到全部氨基酸残基都偶连上去;

(3)偶连完成后,取下反应瓶用DCM清洗,抽干树脂后用预冷的切割液切割,切割下来的多肽进行纯化后得到产品。

2.根据权利要求1所述的vMIP-II蛋白的固相合成方法,其特征在于步骤(1)中所述清洗是用100%乙醇充分清洗。

3.根据权利要求1所述的vMIP-II蛋白的固相合成方法,其特征在于步骤(1)中所述二甲基二氯硅烷的浓度为5%。

4.根据权利要求1所述的vMIP-II蛋白的固相合成方法,其特征在于步骤(2)中所述溶胀为溶胀30min。

5.根据权利要求1所述的vMIP-II蛋白的固相合成方法,其特征在于步骤(3)中所述切割液为1-羟基苯并三氮唑。

6.根据权利要求1所述的vMIP-II蛋白的固相合成方法,其特征在于步骤(3)中所述纯化是用HPLC进行纯化。

7.根据权利要求6所述的vMIP-II蛋白的固相合成方法,其特征在于HPLC纯化在Waters600E 高压液相色谱仪上,用Kromasil 100-5C18柱子进行高压反相色谱。

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