[发明专利]vMIP-II蛋白的固相合成方法有效
申请号: | 201110112488.3 | 申请日: | 2011-05-03 |
公开(公告)号: | CN102241749A | 公开(公告)日: | 2011-11-16 |
发明(设计)人: | 孙晗笑;莫雪梅;李秀英;张光 | 申请(专利权)人: | 暨南大学 |
主分类号: | C07K14/03 | 分类号: | C07K14/03;C07K1/06;C07K1/04 |
代理公司: | 广州粤高专利商标代理有限公司 44102 | 代理人: | 陈卫 |
地址: | 510632 广东*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | vmip ii 蛋白 相合 成方 | ||
1.vMIP-II蛋白的固相合成方法,步骤如下:
(1)固相合成仪的反应瓶清洗后加入二甲基二氯硅烷,通风过夜使反应瓶硅烷化,清洗后在-80℃冷却反应瓶,再次清洗,烘干备用;
(2)称取Wang's树脂置于反应瓶中,加入3倍于树脂体积的DCM溶液,溶胀后排空液体,然后在多肽合成仪上按偶连氨基酸、茚三酮反应检测和α-氨基脱保护的循环从C端到N端进行,直到全部氨基酸残基都偶连上去;
(3)偶连完成后,取下反应瓶用DCM清洗,抽干树脂后用预冷的切割液切割,切割下来的多肽进行纯化后得到产品。
2.根据权利要求1所述的vMIP-II蛋白的固相合成方法,其特征在于步骤(1)中所述清洗是用100%乙醇充分清洗。
3.根据权利要求1所述的vMIP-II蛋白的固相合成方法,其特征在于步骤(1)中所述二甲基二氯硅烷的浓度为5%。
4.根据权利要求1所述的vMIP-II蛋白的固相合成方法,其特征在于步骤(2)中所述溶胀为溶胀30min。
5.根据权利要求1所述的vMIP-II蛋白的固相合成方法,其特征在于步骤(3)中所述切割液为1-羟基苯并三氮唑。
6.根据权利要求1所述的vMIP-II蛋白的固相合成方法,其特征在于步骤(3)中所述纯化是用HPLC进行纯化。
7.根据权利要求6所述的vMIP-II蛋白的固相合成方法,其特征在于HPLC纯化在Waters600E 高压液相色谱仪上,用Kromasil 100-5C18柱子进行高压反相色谱。
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