[发明专利]一种海洋特征寡糖与胶原蛋白肽的复配物及其制备方法和应用

说明书

技术领域

本发明涉及一种海洋特征寡糖与胶原蛋白肽的复配物及其制备方法和应用。

背景技术

近年，随着臭氧空洞的出现，紫外辐射所引起的过量氧自由基已严重危害到人类的健康与环境。皮肤是接受紫外辐照最直接且面积最大的人体器官，作为机体的第一道天然保护屏障，紫外辐射所产生过量的氧自由基对其所造成的损伤最为明显。研究表明，发生于光损伤初始过程中的光老化及细胞的凋亡坏死，对皮肤肿瘤的形成具有极强的促进作用。因此，由紫外线诱发的皮肤疾病，已引起人们的高度重视。

为了减缓由紫外辐照所导致的光损伤，天然抗氧化剂的研制与开发已受到广泛关注。其中，来源丰富，安全低毒，并具有显著抗氧化活性的海洋特征糖类及罗非鱼鱼皮胶原蛋白倍受青睐。近年，随着研究的深入，人们除将目光聚焦于海洋糖类及蛋白外，两者间复配所形成的改性产物也引起了人们的广泛关注，其已能够代替单一的蛋白或糖类生物材料，成功地应用于组织工程学领域。但目前，低分子量甘露糖醛酸与胶原蛋白肽间的复配及其对抗氧化活性的影响却鲜有报道。

发明内容

本发明提供了一种海洋特征寡糖与胶原蛋白肽的复配物及其制备方法和应用，本发明所述的海洋特征寡糖与胶原蛋白肽的复配物具有较强的抗氧化、抗紫外活性，所述复配物可用于抗衰老口服药物及日光照射的化妆品或皮肤用组合物中，并可用于寡糖-肽类复配物线粒体的靶向药物。

为实现上述发明目的，本发明采用下述技术方案予以实现：

一种海洋特征寡糖与胶原蛋白肽的复配物，其特征在于所述复配物由具有抗氧化活性、分子量为2800-3000Da、重量百分比为1-4的胶原蛋白肽溶液与重量百分比为1-10的海洋特征寡糖溶液按1∶(1-10)复配而成。

对技术方案的进一步改进：所述海洋特征寡糖溶液为聚合度为2-8且重量百分比为1-10的甘露糖醛酸溶液、聚合度为2-8且重量百分比为1-5的壳寡糖溶液或聚合度为9-13且重量百分比为1-10的κ-卡拉胶寡糖溶液。

对技术方案的进一步改进：所述胶原蛋白肽为鱼皮胶原蛋白肽。

本发明还提供了一种海洋特征寡糖与胶原蛋白肽的复配物的制备方法，其特征在于它包括以下步骤：

(1)海洋特征寡糖的制备

甘露糖醛酸的制备：用浓度为0.1-0.3M的HCL溶液，将β-D-(1，4)-连接的聚甘露糖醛酸原料配成重量百分比浓度为1-10％的悬浊液，高压反应釜中120℃水解1h，冷却后用0.1M氢氧化钠调节至pH7，经0.45μm膜过滤固形物后，旋转蒸发浓缩，分离，用0.1M碳酸氢铵缓冲液进行洗脱，得到聚合度为2-8的寡糖，经Sephadex G10脱盐后，冷冻干燥得褐色粉末即制得甘露糖醛酸；

或壳寡糖的制备：将壳聚糖原料用乙酸溶解为壳聚糖乙酸溶液(0.01-0.05g/mL)，加入4-6μ/g壳聚糖酶于50℃水解15-20min，调节至pH5.8，继续水解80-100mi n后，100℃灭酶15min，离心，取上清，冷冻干燥得褐色粉末即制得聚合度为2-8的壳寡糖；

或κ-卡拉胶寡糖的制备：用浓度为0.1-0.3M的H₂SO₄溶液，将κ-卡拉胶原料配成重量百分比浓度为1-10％的悬浊液，60℃水解1h，冷却后用BaSO₄调节至pH7，离心，取上清，经0.45μm膜过滤固形物后，旋转蒸发浓缩，分离，用0.1M碳酸氢铵缓冲液进行洗脱，得到聚合度为9-13的寡糖，冷冻干燥得黄色粉末即制得κ-卡拉胶寡糖；

(2)胶原蛋白肽的制备：

将罗非鱼皮作为提取原料，用水将鱼皮洗净，放入0.5-1‰的氢氧化钠中浸泡，去除杂蛋白，再以0.5-1‰醋酸水溶液40-50℃下溶胶，于反应釜中加压灭菌后，将中性食品酶与鱼皮按1∶50于pH 7.5水解1-1.5小时，加热灭菌后，将风味酶与鱼皮按1∶50于pH7.5水解1-1.5小时，使胶原蛋白变成小分子肽，最后经活性炭过滤脱色、浓缩、干燥，即制成分子量为2800-3000Da的罗非鱼鱼皮胶原蛋白肽；

(3)海洋特征寡糖和胶原蛋白肽复配物的制备：