[发明专利]一株恶臭假单胞菌及其转化生产烟酸或异烟酸方法

权利要求书

1.一株新菌株恶臭假单胞菌CGMCC3830(Pseudomonas putida)及应用该菌株催化生产烟酸、异烟酸的方法。其特征在于：所述的恶臭假单胞菌，是从土壤中筛选获得的一株可高效转化3-氰基吡啶为烟酸的菌株；所述的方法，是以3-氰基吡啶、4-氰基吡啶为底物，以发酵培养获得的具有高腈水解酶活性的恶臭假单胞菌CGMCC3830(Pseudomonas putida)为生物催化剂，于pH6.0-10.0、10-40℃下进行水解反应，得到所述产物烟酸、异烟酸。

2.根据权利要求1所述的恶臭假单胞菌CGMCC3830(Pseudomonas putida)用3-氰基吡啶为唯一氮源的筛选培养基从生产腈类化合物的化工厂厂房周围的土壤样品筛选获得。

3.根据权利要求2所述的一株含有腈水解酶高效转化3-氰基吡啶产烟酸菌株，为恶臭假单胞菌CGMCC3830(Pseudomonas putida)，现保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.3830，保藏日期2010年5月11日。

4.根据权利1所述的应用，其特征在于所述的具体方法以3-氰基吡啶、4-氰基吡啶为原料，以发酵培养获得的具有腈水解酶活性的恶臭假单胞菌CGMCC3830(Pseudomonas putida)游离细胞为生物催化剂，在pH6.0-10.0、0.1L-1L磷酸盐缓冲体系中进行水解反应，反应温度10-40℃。

5.根据权利4所述的方法，其特征在于通过摇瓶发酵或发酵罐发酵获得含腈水解酶的恶臭假单胞菌CGMCC3830(Pseudomonas putida)细胞，所述的含酶细胞的添加量为0.5-5g/L(细胞干重)。

6.根据权利4所述的方法，其特征在于所述含酶细胞的制备方法：恶臭假单胞菌CGMCC3830(Pseudomonas putida)由种子培养基中转接至发酵培养基，在20-35℃培养24-48h，培养得到的发酵液经离心洗涤，得到所述含酶细胞。

7.根据权利4所述的方法，其特征适用于在于恶臭假单胞菌CGMCC3830(Pseudomonas putida)的发酵培养基组成如下：甘油0.5％-2％，胰蛋白胨0.5％-2％，酵母膏0.25％-1％，磷酸二氢钾0.05％-2％，氯化钠0.1％-1％，尿素0.5％-2％，pH 5.6-8.4。

8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于所述反应体系中，3-氰基吡啶和4-氰基吡啶的起始浓度为0.05M-0.2M，当反应过程中底物浓度低于0.01M时，继续补入底物至浓度为0.05M-0.2M，于pH6.0-10.0、10-40℃下进行水解反应6h-10h，水解反应结束后，于水解液中得到烟酸、异烟酸。