[发明专利]一种胶原原液及润眼液的制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种胶原原液及润眼液的制备方法。

背景技术

角膜结膜干燥症又称干眼症，是由于泪液质和量的异常或泪液流体动力学异常引起的泪膜不稳定和眼表损害，从而导致眼部不适症状的一类疾病。干眼是多因素的病因，其中，长期使用含有防腐剂的润眼液或护理液是现代人产生眼部干眼症的最主要原因之一。

润眼液中添加一定含量的防腐剂虽利于制剂保存，但长期使用可导致正常人眼角膜表浅性刺激或损伤，从而引发或加重干眼症状。新洁尔灭作为常规防腐剂被广泛应用于各类润眼液中，一般添加量为0.1g/ml，有研究发现，长期使用含新洁尔灭的润眼液，会对眼角膜上皮细胞造成不可逆的损伤，开始时出现视力下降，眼睛充血或视物模糊等症状，继而引起上皮细胞变性、脱落，严重可导致角膜溃疡或者糜烂。

胶原由三条肽链拧成螺旋形的纤维状的细胞外蛋白质，占全身蛋白质的30%以上，具有独特的生理活性。胶原蛋白富含人体必需的甘氨酸、脯氨酸、羟脯氨酸等氨基酸，是细胞外基质中最重要的组成部分，具有强的生物活性及生物功能，能参与细胞的迁移、分化和增殖，使骨腱、软骨和皮肤具有一定的机械强度，且由于其微弱的抗原性和良好的生物相容性，在烧伤、创伤、眼角膜疾病、美容、硬组织修复、创面止血等医药卫生领域用途广泛，在眼组织中主要分布于角膜和巩膜。

胶原虽具有较好的生物学性能，但作为一种天然活性蛋白，生产中若处理工艺不当，极易变性丧失活性，无法达到治疗或保健的目的。同时由于胶原富含营养，非常容易滋生微生物，在这种情况下，一般需要在胶原溶液中添加防腐剂和/或抗生素，以保证胶原溶液在贮存期间不发生变质。但是添加防腐剂和/或抗生素，又会引起耐药性、刺激性等副作用，严重者可能引起干眼症、青光眼等发生。

在眼用制剂中，胶原膜虽然已被广泛的应用于眼部损伤治疗研究，但用于眼部日常保健和护理产品，目前尚未有成熟的产品推出市场。要获得可实际应用的胶原蛋白润眼液，需要一种可大规模制备无菌无害，且可保持胶原活性的胶原蛋白液的方法。

发明内容

本发明的目的在于提供一种胶原原液及润眼液的制备方法。

本发明所采取的技术方案是：

一种胶原原液制备方法，包括如下步骤：

1)  将原料用新洁尔灭溶液浸泡，之后使用过氧乙酸与乙醇混合溶液浸泡，进行消毒和无害化处理；

2)  将消毒和无害化处理的原料清洗干净，用醋酸溶液浸泡12～48小时，得到胶原原液。

优选的，所述新洁尔灭溶液的浓度为0.1～0.5%。

优选的，所述新洁尔灭溶液的浸泡时间为10～25min。

优选的，过氧乙酸与乙醇混合溶液中，过氧乙酸的体积浓度为0.1～0.3%，乙醇的体积浓度为70～75%。

优选的，所述过氧乙酸与乙醇混合溶液的浸泡时间为10～30min。

优选的，所述醋酸溶液的浓度为0.05～1.0M。

一种一次性胶原润眼液的制备方法，包括以下步骤：

1)  将上述方法制得的胶原原液酸溶、纯化，得到胶原蛋白液；

2)  调节胶原蛋白液的浓度和渗透压，无菌条件下灌装、密封，得到一次性胶原润眼液。

优选的，所述一次性胶原润眼液的规格为0.1～2ml/支。

所述一次性胶原润眼液适用于眼球的清洗、润滑保湿、干眼症的日常护理及角膜损伤创面的止血修复。

本发明的胶原原液的制备方法，可有效地杀灭原料中的各种微生物及有害物质。同时，不会使胶原的活性失活，保证制得的各种胶原产品具有良好的生物活性。

本发明方法制得的润眼液，由胶原蛋白、渗透压调节剂和注射用水组成，对干眼症有良好的疗效，可有效的修复角膜，适用于眼球的清洗、润滑保湿、干眼症的日常护理及角膜损伤创面的止血修复。润眼液中不含防腐剂、抗生素，有效地避免了防腐剂、抗生素对眼睛的伤害。

附图说明

图1是动物实验中模型对照眼的病理图；

图2是使用本发明方法制备的润眼液用于动物实验研究中的治疗眼的病理图；

图3是本发明方法制备的润眼液用于眼角膜创伤修复的治疗研究效果图；

图4是本发明方法制备的润眼液的紫外吸收峰定性检测图；

图5是本发明方法制备的润眼液的高效液相色谱法定性检测图；

图6是本发明方法制备的润眼液的SDS-PAGE电泳图。

具体实施方式

一种胶原原液制备方法，包括如下步骤：

1)  将原料用新洁尔灭溶液浸泡，之后使用过氧乙酸与乙醇混合溶液浸泡，进行消毒和无害化处理；