[发明专利]用于治疗菌群失调症菌群紊乱症的大肠埃希氏菌、制剂及其制备方法有效
申请号: | 201110117270.7 | 申请日: | 2011-05-06 |
公开(公告)号: | CN102229898A | 公开(公告)日: | 2011-11-02 |
发明(设计)人: | 苏建荣;马立艳;闫东辉;许淑珍;王建成;陈力;吕治;尉景娟;徐小用;曾昭瑛 | 申请(专利权)人: | 首都医科大学附属北京友谊医院 |
主分类号: | C12N1/20 | 分类号: | C12N1/20;A61K35/74;A61P1/00;C12R1/19 |
代理公司: | 北京北新智诚知识产权代理有限公司 11100 | 代理人: | 景志 |
地址: | 100050*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 用于 治疗 失调 症菌群 紊乱 大肠 埃希氏菌 制剂 及其 制备 方法 | ||
1.一种用于治疗菌群失调症菌群紊乱症的大肠埃希氏菌,其特征在于,所述大肠埃希氏菌的保藏编号为CGMCC No.4697。
2.一种用于治疗菌群失调症菌群紊乱症的灌肠制剂,其特征在于,所述制剂包含有权利要求1所述的保藏编号为CGMCC No.4697的大肠埃希氏菌。
3.根据权利要求2所述的灌肠制剂,其特征在于,所述灌肠制剂为栓剂或灌肠液。
4.根据权利要求3所述的灌肠制剂,其特征在于,所述栓剂或灌肠液中含有保藏编号为CGMCC No.4697的大肠埃希氏菌菌液,菌液浓度为1.5×108~9.0×108CFU/ml。
5.一种灌肠制剂的制备方法,其特征在于,具体步骤为:
(1)挑取大肠埃希氏菌CGMCC No.4697菌落,接种到5ml营养肉汤中,置30~35℃电热恒温培养箱培养6h;
(2)用营养肉汤调制成0.5~3.0麦氏浊度大肠埃希氏菌液,得到活菌终浓度为1.5×108~9.0×108CFU/ml的大肠埃希氏菌液。
(3)分装即得。
6.根据权利要求5所述的灌肠制剂的制备方法,其特征在于,所述大肠埃希氏菌CGMCC No.4697在使用前进行纯培养,方法为:接种大肠埃希氏菌CGMCCNo.4697在血琼脂平板和麦康凯平板上,置35℃电热恒温培养箱培养18~24h后进行菌种鉴定。
7.根据权利要求6所述的灌肠制剂的制备方法,其特征在于,菌种鉴定方法为:挑取血琼脂平板上的灰白色菌落或麦康凯平板上乳糖发酵菌落,涂片革兰染色镜检为革兰阴性杆菌,氧化酶试验阴性,做双糖、尿素、吲哚、枸橼酸盐、鸟氨酸、赖氨酸、氨基酸空白试验,若产酸/产气、不产硫化氢、尿素酶阴性,吲哚阳性、枸橼酸盐阴性、赖氨酸阳性,鉴定为大肠埃希氏菌;经VITEK鉴定仪确认为大肠埃希氏菌,并经血清学检测最终确认为非引起肠道感染的大肠埃希氏菌。
8.根据权利要求7所述的灌肠制剂的制备方法,其特征在于,所述大肠埃希氏菌CGMCC No.4697纯培养后的菌种直接使用或转种在脱脂牛奶中,-70℃保存,使用时复苏。
9.根据权利要求8所述的灌肠制剂的制备方法,其特征在于,所述复苏步骤为:将保存在-70℃冰箱中的相应菌株取出转种血琼脂平板或麦康凯平板,置35℃电热恒温培养箱培养18~24h,复苏后用于制备灌肠制剂。
10.权利要求1所述的保藏编号为CGMCC No.4697的大肠埃希氏菌在制备治疗菌群失调症灌肠制剂或菌群紊乱症灌肠制剂中的应用。
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