[发明专利]DLK1在肝癌诊断及预后判断中的应用

说明书

技术领域

本发明涉及肿瘤学和诊断领域。更具体地，本发明涉及DLK1在肝癌诊断及预后判断中的应用。

背景技术

DLK1(Delta-like 1 homologue)，也被称为Pref-1(前脂肪细胞因子-1)，是首先在神经母细胞瘤发现并克隆的基因(Laborda J et al，J Biol Chem，1993，268(6)：3817-3820)，定位于人染色体人14q32。

DLK1蛋白在细胞分化方面起到一定的作用，尤其在内胚层起源的肝细胞、呼吸道上皮细胞中有表达，随着胎儿胎龄的增加，正常组织中DLK1的表达逐渐减少。

人基因Dlk1(GeneBank登录号BC007741)全长1557bp，开放阅读框含有1152个核苷酸，编码383个氨基酸残基。DLK1蛋白是一种跨膜蛋白，包含细胞内信号肽，中间跨膜区及细胞外区，其中细胞外区由6个表皮生长因子样(epidermal growth factor-like repeat，EGF-like repeat)串联重复组成。因此DLK1属于EGF样超家族的成员之一。

DLK1蛋白通过胞外结构域的糖基化以及同源和异源二聚体来调节其细胞生物学活性，根据其糖基化程度的不同，DLK1蛋白的分子量约在45-60kD之间。其胞外结构域上有两处蛋白酶加工的位点，在跨膜区近侧，经蛋白酶作用后，会产生分泌性蛋白片段，释放到细胞外发挥其生物学效应。

DLK1在人和啮齿类胚肝中高表达，但成体肝组织中无表达。DLK1与肝脏纤维化甚至肝硬化密切相关。

有报道称，在小鼠中DLK1可以作为一个肝干细胞标志富集肝母细胞，而且DLK1阳性的肝细胞可进一步分化成为肝细胞和胆管上皮细胞(Oertel M et al，Gastroenterology，2008：134：823-832；Tanimizu N et al，J Cell Sci，2003：116：1775-1786)。

目前发现DLK1在多种肿瘤中的表达上调，其中包括小细胞肺癌(Laborda Jet al，J Biol Chem，1993：268：3817-3820)、神经内分泌肿瘤(Yin D etal，Oncogene，2006：25：1852-1861)和肝癌(Jin ZH et al，Expert Opin Biol Ther 2008：8：371-377；Dezso K et al，Virchows Arch，2008：452：443-448；Huang J et al，Carcinogenesis，2007：28：1094-1103)等。本发明人前期研究表明，DLK1在肝癌组织中的表达显著上调(71.9％)，而且外源性表达DLK1可以明显促进肝癌细胞系的体外增殖和裸鼠体内成瘤能力(Yu Fet al，Liver International，2010：1478-3223)。

原发性肝细胞肝癌(hepatocellular carcinoma，HCC)是我国最常见恶性肿瘤之一，占居民肿瘤死亡第二位。肝癌出现症状时多属中晚期，切除后复发、转移率高。因此，肝癌的早期诊断以及预后判断对延长患者的生存时间和降低肝癌死亡率具有重要意义。

目前肝癌的诊断主要依靠影像学检查、肝穿刺组织学检查等方法，然而这些检测方法均具有一定的局限性。例如即使是很好的细针穿刺仍因取材有限而有较高的假阴性率，并且有使肿瘤扩散和针道种植的危险。癌症的血清学检测技术一直是研究的重点。然而，目前现有的针对癌症(如HCC)检测尚缺乏令人满意的血清标志物，更缺乏可用于血清检测或肝癌预后检测的血清标志物。

因此，本领域迫切需要开发可用于血清检测或肝癌预后检测的血清特异标志物。

发明内容

本发明的目的就是提供一种可用于血清检测或肝癌预后检测的血清特异标志物。

在本发明的第一方面，提供了前脂肪细胞因子-1(DLK1蛋白)或其特异性抗体的用途，它被(a)用于制备肝癌预后检测的诊断试剂或试剂盒；或(b)用于制备血清检测肝癌的诊断试剂或试剂盒。

在另一优选例中，所述的DLK1蛋白或其特异性抗体偶联有或带有可检测标记。

在另一优选例中，所述可检测标记选自下组：生色团、化学发光基团、荧光团、同位素或酶。

在另一优选例中，所述诊断试剂是单克隆抗体。

在另一优选例中，所述的特异性抗体是单克隆抗体。

在另一优选例中，所述的肝癌预后检测是血清检测。