[发明专利]一种澳洲茄碱的制备方法

说明书

技术领域：

本发明涉及一种澳洲茄碱的制备方法，特别是涉及一种应用超临界CO₂萃取和高速逆流色谱制备澳洲茄碱的方法。

背景技术：

澳洲茄碱又叫α-澳洲茄碱，茄解碱，分子式C₄₅H₇₃NO₁₆，分子量884.06，分子结构式：

澳洲茄碱为针状结晶(甲醇)，熔点301～303℃，旋光度-88°(c＝1.01，吡啶)，旋光度-74.5°(c＝0.51，甲醇)，溶于热乙醇和热二氧六环，微溶于热水和稀醋酸，不溶于氯仿和乙醚。其具有抗炎、抗升高血糖、抗肿瘤作用。专利(申请号：200810033619.7)“龙葵提取物、其制备方法及其药物用途”公开了含澳洲茄碱的龙葵提取物制备方法和作为活性成分制备预防和治疗肿瘤、糖尿病、哮喘病、冠心病等疾病的药物的用途。专利(申请号：200610163227.3)“龙葵总碱的抗肿瘤作用及其药物制剂”，该专利公开了龙葵总碱体外对各种肿瘤细胞均具有较强的抑制作用；对HEP、S180移植性实体瘤均具有较强的抑瘤作用；对动物移植性肿瘤放、化疗具有显着的抗肿瘤增效作用，说明该提取物具有很好的抑瘤作用。

龙葵为茄科植物龙葵的干燥地上部分，味苦、微甘，性寒，归肺、肝、胃经。能清热解毒，消肿散结，消炎利尿。主治疮疖肿痛，尿路感染，小便不利，肿瘤等。近年来因其所含有生物碱的抗癌活性而日益成为研究的热点，研究发现，澳洲茄碱、澳洲茄边碱是其主要活性成分。

现有制备澳洲茄碱的公开方法较少，制备方法多是采用乙醇提取，大孔树脂或离子树脂分离，反复萃取后再硅胶柱分离。文献“龙葵药材中澳洲茄碱、澳洲茄边碱的含量测定”，该文献公开的方法是取龙葵药材粗粉，80％乙醇提取2次，合并2次提取液，减压回收至无醇味，上HPD100大孔树脂分离纯化，分别用水、15％乙醇除杂。收集70％乙醇洗脱部分，回收乙醇至无醇味，加适量1％氢氧化钠溶液调pH至9，静置，离心，所得沉淀再上葡聚糖凝胶LH-20进行纯化，即得澳洲茄碱和澳洲茄边碱纯品。专利(申请号：200810033619.7)“龙葵提取物、其制备方法及其药物用途”公开的方法是离子树脂分离，得到低含量产物。

如上所述现有制备高含量澳洲茄碱的方法，繁琐复杂，而且生产过程污染严重，工业化程度较低。

发明内容

本发明的目的在于克服现有制备工艺中的不足，提供一种澳洲茄碱的制备方法，所得产品含量高，收率高，而且污染小。

为了实现上述目的，本发明的技术方案如下：

一种澳洲茄碱的制备方法，其特征在于包括以下步骤：以龙葵药材为原料，粉碎，氨化2-3小时，加入萃取釜，采用超临界CO₂萃取，以甲醇溶液为夹带剂，萃取2-3小时，解析萃取液回收试剂，萃取物用石油醚洗涤，再用高速逆流色谱分离，ELSD检测器监测，收集流分，回收试剂，甲醇重结晶，干燥即得高含量澳洲茄碱。

所述超临界CO₂萃取条件为：萃取温度为50-60℃，萃取压力为30-35MPa，分离釜I温度为50-55℃，压力为7-10MPa，分离釜II温度为45-50℃，压力为5-6MPa，夹带剂用量为原料的1-2倍量。

所述的高速逆流色谱分离溶剂系统为正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水或氯仿-甲醇-水。优选的溶剂系统为：正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水按22∶25∶17∶19配制，取上相加入1mol/L三乙胺做固定相；氯仿-甲醇-水按5∶3∶2配制，取上相加入0.5mol/L磷酸二氢钾作流动相。

本发明的优点是：超临界CO₂萃取，提取时间短，效率高，能耗较低，CO₂重复利用，绿色环保；采用高速逆流色谱分离，产品无损失，是一种高效分离方法，制备周期短，试剂可以重复利用，制备量大，无废弃物产生。

下面将结合具体实施方式进一步说明本发明，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。

具体实施方式：

实施例1：