[发明专利]牛肠道病毒中国分离株及其感染性cDNA克隆的构建和应用有效
申请号: | 201110120089.1 | 申请日: | 2011-05-10 |
公开(公告)号: | CN102776155A | 公开(公告)日: | 2012-11-14 |
发明(设计)人: | 于力;常继涛 | 申请(专利权)人: | 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所 |
主分类号: | C12N7/00 | 分类号: | C12N7/00;A61K35/76;A61K39/125;A61K48/00;A61P31/14;C12Q1/70;C12N15/41;C07K14/085;C12N15/66;C12N15/63;C12R1/93 |
代理公司: | 北京科龙寰宇知识产权代理有限责任公司 11139 | 代理人: | 孙皓晨;余光军 |
地址: | 150001 黑龙*** | 国省代码: | 黑龙江;23 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 肠道病毒 中国 分离 及其 感染性 cdna 克隆 构建 应用 | ||
1.一株牛肠道病毒(Bovine Enterovirus)中国分离株,其特征在于,其微生物保藏号是:CGMCC No.4782。
2.权利要求1所述的牛肠道病毒中国分离株在制备预防或治疗由牛肠道病毒所致疾病的药物中的用途。
3.权利要求1所述的牛肠道病毒中国分离株在制备诊断或检测由牛肠道病毒所致疾病的试剂中的用途。
4.牛肠道病毒(Bovine Enterovirus)中国分离株的全基因,其特征在于:其核苷酸为SEQ ID No.1所示。
5.权利要求4所述全基因所编码的蛋白,其特征在于:其氨基酸为SEQ ID No.2所示。
6.权利要求4所述的全基因在制备预防或治疗由牛肠道病毒所致疾病的药物中的用途。
7.权利要求1所述的牛肠道病毒(Bovine Enterovirus)中国分离株的全长感染性cDNA克隆的构建方法,包括:
(1)、提取权利要求1所述牛肠道病毒中国分离株的总RNA;
(2)、以所述总RNA为模板,用oligo(dT)引物反转录合成cDNA;
(3)、用根据牛肠道病毒RNA设计带有酶切位点的特异性引物,分段扩增所述cDNA各片段,并分别克隆入质粒载体;所述的特异性引物的核苷酸分别为SEQ ID No.3、SEQ ID No.4、SEQ ID No.5、SEQ ID No.6、SEQ ID No.7、SEQ ID No.8、SEQ ID No.9或SEQ ID No.10所示。
(4)、将上述cDNA各片段连接构成带有基因组全长cDNA的质粒载体,即得。
8.B族基因2型牛肠道病毒的全长感染性cDNA克隆,其特征在于:其微生物保藏号是:CGMCC No.4781。
9.权利要求8所述的全长感染性cDNA克隆在拯救B族基因2型牛肠道病毒中的应用。
10.权利要求8所述的全长感染性cDNA克隆在作为疫苗载体中的用途。
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