[发明专利]一种胭脂花组培繁殖的种质保存方法有效
申请号: | 201110121244.1 | 申请日: | 2011-05-11 |
公开(公告)号: | CN102228004A | 公开(公告)日: | 2011-11-02 |
发明(设计)人: | 潘会堂;游晓会;张启翔;孙明;程堂仁;王佳 | 申请(专利权)人: | 北京林业大学 |
主分类号: | A01H4/00 | 分类号: | A01H4/00 |
代理公司: | 北京路浩知识产权代理有限公司 11002 | 代理人: | 王加岭;张庆敏 |
地址: | 100083 *** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 胭脂 花组培 繁殖 种质 保存 方法 | ||
技术领域
本发明涉及植物种质的保存方法,具体涉及一种胭脂花(Primul a maximowiczii)组培繁殖的种质保存方法。
背景技术
胭脂花是原产于我国北方的报春花属多年生草本植物,花色鲜艳,观赏价值高,是一种具有很高园林应用潜力的野生花卉。
野生胭脂花群体中存在丰富的观赏价值高的天然变异,主要表现在花色、花眼变异,这些变异为胭脂花的园林应用提供了丰富的种质材料。但由于胭脂花属典型的异花授粉植物,用种子繁殖易丧失优良性状,分株方法增殖系数太低,同时栽培条件较为苛刻,无法有效保存优良种质或品种。本发明则利用组织培养技术来解决胭脂花优良种质的保存问题,迄今国内外尚未有相关方面的研究报道。
发明内容
本发明的目的在于提供一种胭脂花组培繁殖的种质保存方法。
为了实现本发明目的,本发明提供了一种胭脂花组培繁殖的种质保存方法,该方法包括低温处理后的外植体经表面灭菌后,进行不定芽的诱导,所述的不定芽的诱导培养基为以MS为基本培养基,添加0.2~1.0mg/L 6-BA,0~0.2mg/L IBA,20-40g/L蔗糖的固体培养基,pH为5.9-6.0。
其中,该种质保存方法还包括增殖和继代培养,所述的增殖和继代培养基为以MS为基本培养基,添加0.5~1.0mg/L 6-BA,0.05~0.5mg/L NAA,20~40g/L蔗糖的固体培养基,pH为5.9~6.0;所述的继代培养每隔1~2月继代一次。
其中,该种质保存方法还包括生根培养,所述的生根培养的培养基为以MS为基本培养基,添加0.02~0.05mg/L IBA,20~40g/L蔗糖的固体培养基,pH为5.9。其中,该种质保存方法还包括组培苗的移栽,所述的组培苗的移栽选择在生根培养3~4周后,平均每株生根4~5条,打开瓶盖,炼苗4~5天,待叶色加深,再移栽到温室,栽培基质为草炭∶珍珠岩为2∶1(体积比);开始一周使湿度保持在80%以上,每天喷水2~3次,移栽温度为18~25℃。
其中,所述的不定芽的诱导培养基优选为以MS为基本培养基,添加1.0mg/L 6-BA,0.2mg/L IBA,20~40g/L蔗糖的固体培养基,pH为5.9。
其中,所述的增殖和继代培养基优选为以MS为基本培养基,添加1.0mg/L 6-BA,0.2mg/L NAA,20~40g/L蔗糖的固体培养基,pH为5.9。
其中,所述的生根培养的培养基优选为以MS为基本培养基,添加0.02mg/L IBA,20~40g/L蔗糖的固体培养基,pH为5.9。
其中,所述低温处理温度为-2~-5℃,时间为2~4个月。
其中,所述的外植体为顶芽中带腋芽的幼叶。
其中,所述的顶芽中带腋芽的幼叶在接种时切成1.5cm×1.5cm带腋芽的方块。
其中,所述的外植体表面消毒过程如下:剥去外层叶片的顶芽经洗洁精和自来水洗净,流水下冲洗30~40min后,置于75%酒精中处理30s左右,然后再经0.1%升汞消毒7~8min,无菌水冲洗5~6次后将带腋芽幼叶剥下。
其中,所述的芽的诱导、增殖、继代、生根培养时光照条件为自然散射光2500~3000Lux加人工辅助光1500~2000Lux,光照时间为14h/d,培养温度为20~25℃。所述的芽的诱导时间为15~20d。
本发明的一种胭脂花组培繁殖的种质保存方法,2个月内繁殖系数达到4~6,生根率96%以上,移栽成活率近100%;同时,以顶芽中带腋芽的幼叶为外植体繁殖保存的胭脂花种质可保持遗传稳定性,为新品种和优异种质的保存提供了保障。
与常规方法相比,本发明的优点在于:
1.胭脂花是典型的自交不亲和植物,很难采用实生繁殖方法获得稳定遗传的保持原种质遗传性状的后代。利用本方法保存繁育的胭脂花可稳定遗传。
2.与分株方法进行种质保存和繁殖的方法相比,本发明不受自然条件或地区差异的限制,繁殖系数高,可以随时大规模提供种苗。
3.减少常规种质保存用地:常规的种质保存方法需要占用一定的土地,且易感染病毒、病害,造成种质资源退化。利用本发明提供的方法,可以减少用地,并可以对生长过弱、严重感病的种质进行脱毒培养,复壮、纯化,达到种质长期保存的目的。
附图说明
图1为本发明所述经过表面消毒后的胭脂花的顶芽;
图2为本发明所述利用幼叶为外植体诱导芽的情况;
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