[发明专利]EB病毒miR-BART1-5p反义寡聚核苷酸在制备治疗鼻咽癌的药物中的应用

说明书

技术领域

本发明属于含有两个或多个单核苷酸单元的化合物领域，特别是涉及具有以核苷基的糖化物基团连接的单独的磷酸酯基或多磷酸酯基的化合物。

背景技术

鼻咽癌(NPC)是我国南方地区常见的头颈部恶性肿瘤，是头颈部肿瘤中复发率和转移率最高的疾病，颈部淋巴结转移率高达80％，治愈后5年内仍有20～30％患者出现鼻咽癌的复发和转移，是临床上导致死亡的主要因素之一，传统治疗手段如手术、放疗或化疗等对防治鼻咽癌的复发、转移效果不理想，相比较而言，应用生物治疗方法更适合第二阶段的治疗，其中基因疗法对防治鼻咽癌的复发、转移具有更重要的临床意义。

EB病毒(Epstein Barr virus，EBV)是一种γ疱疹病毒，几乎所有的未分化和低分化鼻咽癌都与EB病毒潜伏性感染有关。近来研究发现EB病毒编码的miRNA可参与调控EB病毒编码的基因和人宿主基因的表达EBV-miR-BART2能与编码病毒DNA聚合酶的基因BALF5的3`UTR完全互补。在裂解感染期大量病毒复制时，miR-BART2表达水平降低，对BALF5基因的分解作用减弱，有利于病毒复制循环。随着miR-BART2选择压力变化，BALF5表达降低，EBV感染细胞释放的病毒颗粒不断减少，感染进入潜伏状态(Nucleic Acids Res 37：1035-48，2009)；EBV-miR-BHRFI-3与细胞IFN诱导的T细胞趋化因子CXCL-11/I-TAC的表达水平相关，推测CXCL-11/I-TAC是miR-BHRFl-3作用靶点，EB病毒可以此作为调节方式来干扰宿主的免疫监视和免疫清除作用(Cancer Res 68：1436-42，2008)；EBV-miR-BART5能通过抑制宿主的凋亡前蛋白PUMAHl，上调P53的表达。如果从EBV感染的细胞中去除miR-BART5，将促进PUMA介导的凋亡作用，提示EBV能够抑制凋亡的发生，从而保护其感染的上皮细胞(J Exp Med 205：2551-60，2008，J Biol Chem 285：33358-70，2010)；miR-BART6-5p能抑制EBNA2病毒癌基因的表达，而这种癌基因的表达在I型和II型潜伏状态(免疫低反应)向III型潜伏状态(免疫高反应)转化的过程中是不可缺少的，表明miR-BART6在EBV的感染和潜伏中发挥重要的调节作用(J Biol Chem 285：33358-70，2010)。由此可见，EB病毒miRNA一方面可作用于病毒本身的靶基因，促进病毒的感染和潜伏，另一方面也可以作用于宿主的靶基因，促进病毒逃避宿主细胞的免疫反应，并抑制宿主细胞的凋亡。

然而，有关EB病毒miR-BART1-5p的作用及机制的研究却很少，Lo等(PNAS 104：16164-9，2007)报道3种EB病毒编码的miRNA(miR-BART1-5p，miR-BART16和miR-BART17-5p)可下调EB病毒的LMP1基因的表达。当LMP1受到病毒miRNA调控时，其下游信号途径会受到抑制，NF-KB表达降低，凋亡受到抑制，使EB病毒感染的细胞易向肿瘤发展(Cell Mol Immunol 4：185-96，2007)。另有报道EBV-miR-BART1可与BBLF4和LMP2A mRNA3’端结合，从而达到调节病毒自身基因表达的目的(PNAS，90：378-382，1993)。重要的是，迄今为止，有关EB病毒miR-BART1-5p与其他EB病毒miRNA促进鼻咽癌发生发展尤其是促鼻咽癌侵袭转移的作用仍未见任何报道。