[发明专利]肿瘤抗原及其应用

说明书

技术领域

本发明涉及癌症治疗及诊断领域，特别涉及KRT81、VGLL1、SLC6A3、SNX31、REG1B、C11orf63、IGF2BP3、IQGAP3、KRT23、CLCA2、REG3A在制备用于肿瘤诊断和/或治疗的试剂盒中的应用。

背景技术

恶性肿瘤现已成为威胁人类健康的第一大杀手。近年来，在恶性肿瘤的治疗方面，手术治疗、化疗和放疗都取得了很大的进步，病人的5年生存率也不断提高。但总体而言，目前恶性肿瘤的治疗效果和预后仍然较差。因此，寻找更加有效的治疗途径极为必要。免疫治疗，作为一种新的生物治疗方法，越来越受到人们的关注和重视。

现有的免疫治疗方案大致可以分为过继免疫治疗(如细胞过继转移)和主动免疫治疗(即治疗性肿瘤疫苗)两大类。要进行有效的免疫治疗，寻找免疫原性强的肿瘤抗原是关键。传统的鉴定肿瘤抗原的方法有T细胞克隆筛选(见参考文献1)，SEREX(Serological Identification of antigens by Recombinant cDNA expressing cloning，重组cDNA表达文库的血清学分析)(见参考文献2)和抑制性删减杂交(见参考文献3)等，但这些方法普遍存在实验周期长、花费高等缺点。近年来用生物信息学策略筛选肿瘤相关抗原取得进展，缩短了研究的周期。

发明内容

本发明的目的在于运用生物信息学策略高通量地开发出新的肿瘤相关抗原。

为实现本发明的目的，本发明提供了IGF2BP3、IQGAP3、KRT23和CLCA2基因作为联合诊断标志物在制备用于肺癌诊断试剂盒中的应用。

本发明还提供了IGF2BP3、IQGAP3、KRT23和CLCA2基因编码的蛋白作为联合诊断标志物在制备用于肺癌诊断试剂盒中的应用。

本发明还提供了一种用于肺癌诊断和/或预后的试剂盒，所述试剂盒含有用于在PCR中合成IGF2BP3、IQGAP3、KRT23和CLCA2基因DNA链和/或其cDNA链的PCR引物。

本发明还提供了一种用于肺癌诊断和/或预后的试剂盒，所述试剂盒含有IGF2BP3、IQGAP3、KRT23和CLCA2蛋白。

本发明还提供了VGLL1和SNX31基因作为联合诊断标志物在制备用于膀胱癌诊断试剂盒中的应用。

本发明还提供了VGLL1和SNX31基因编码的蛋白作为联合诊断标志物在制备用于膀胱癌诊断试剂盒中的应用。

本发明还提供了一种用于膀胱癌诊断和/或预后的试剂盒，所述试剂盒含有用于在PCR中合成VGLL1和SNX31基因DNA链和/或其cDNA链的PCR引物。

本发明还提供了一种用于膀胱癌诊断和/或预后的试剂盒，所述试剂盒含有VGLL1和SNX31蛋白。

本发明还提供了一种筛选肿瘤抗原抗体的方法，该方法是PARSE方法和免疫沉淀法的结合。

附图说明

图1a显示肿瘤基因在正常组织中限制性表达。

图1b显示肿瘤基因在配对的癌组织中表达上调。

图2显示肿瘤基因在25种肿瘤细胞系中的表达情况。

图3显示PARSE和IP肿瘤筛选新策略与传统ELISA和蛋白质印记策略对比。

图4a显示肿瘤基因在癌症病人血清中能产生自发抗体(PARSE法)，其中阳性血清判断标准：＞正常人血清CPM值均值+3倍标准差。右下角显示的数值为标准差的倍数：≤3为白色，＞3颜色随倍数的增加而变深。

图4b显示肿瘤基因在癌症病人血清中能产生自发抗体(IP法)。

图5显示IGF2BP3、IQGAP3、KRT23、CLCA2可作为肺癌的联合诊断标记物。

图中文字的描述：

图1b：TCC＝膀胱移行细胞癌；NSCLC＝非小细胞肺癌；GA＝胃腺癌；RCC＝肾细胞癌；CA＝结肠腺癌。T＝肿瘤组织；N＝相应的配对正常组织。

图4a：Anti-His＝抗his；cancer patent’s sera＝癌症患者血清；Normal sera＝正常血清。

图4b：Non small cell lung carcinoma＝非小细胞肺癌；Normal＝正常；Input＝内参；Gastriccancer＝胃癌；Renal cell carcinoma＝肾细胞癌；Transitional cell carcinoma＝移行细胞癌。

图5：AUC表示曲线下面积。