[发明专利]抗肿瘤药物罗米迪司肽的关键中间体的合成方法

说明书

技术领域

本发明涉及药物合成领域，具体涉及抗肿瘤药物罗米迪司肽的关键中间体的合成方法。

背景技术

罗米迪司肽(Romidepsi，FK-228，FK-901228，药物商品名：ISTODAX)是从紫色素(Chromobacteriumviolaceum)的肉汤培养基中分离得到的双环四肽，具有特殊的缩酯环肽结构，结构式如(1)所示，可有效透过细胞膜，通过抑制组蛋白去乙酰酶而显示良好的抗肿瘤活性。临床研究表明，罗米迪司肽可对多种肿瘤产生作用，对皮肤T-细胞淋巴瘤及耐药性肿瘤的疗效尤为显著。并于2004年10月被美国食品药品管理局列入“快速审批”通道，于2009年11月正式通过审批，2010年1月正式上市。经美国食品药品管理局和欧洲医药评价署批准的代号为GPl04-0001。二期临床研究数据显示，罗米迪司肽在原发性皮肤T细胞淋巴瘤患者中的应答率达50％。此外，罗米迪司肽治疗各种血液系统疾病和恶性实体肿瘤的临床试验也在进行中。

罗米迪司肽除通过二硫键及酯键形的成双环结构外，其氨基酸序列还具有通过酰键和酯键交替连接的特点。罗米迪司肽既含有普通L型缬氨酸，也含有D型缬氨酸，D型半胱氨酸以及带有双键的稀有氨基酸(Z)-2-氨基-2-丁烯酸和含巯基的链状结构单元(3S，4E)-3-羟基-7-巯基4-庚烯。

罗米迪司肽合成过程中的关键中间体，氨基端保护的线性四肽，化学名称如下：(N--[(Fluorenylmethoxy)carbonyl]-D-Valyl-D-Cysteinyl-(S-triphenylmethyl)-(Z)-dehydrob utyrinyl-L-valine methyl ester)，结构式如下图所示：

上述罗米迪司肽的关键中间体的一条合成路线^[1]如下：

该合成方法以Fmoc-L-Val-OH为起始物，用二环己基碳二亚胺(DCC)和4-二苯乙酰氧基-N-甲基-哌啶甲碘化物(DAMP)处理得到Fmoc-L-Val-OTMSE((S)-2-(9H-Fluoren-9-ylmethoxycarbonylamino)-3-methyl-butyric Acid 2-Trimethylsilanyl-ethyl Ester)，再用二乙胺(Et₂NH)处理，脱除Fmoc形成L-Val-OTMSE。之后再以六氟磷酸苯并三唑-1-基-氧基三吡咯烷基磷(PyBop)为缩合剂，L-Val-OTMSE与Fmoc-Thr-OH缩合，形成N-Fmoc保护的二肽((S)-2-[(2S，3R)-2-(9H-Fluoren-9-ylmethoxycarbonylamino)-3-hydroxy -butyrylamino]-3-methyl-butyric Acid 2-Trimethylsilanylethyl Ester)，接着用Et₂NH脱除Fmoc得到二肽。之后二肽与Fmoc-D-Cys(Tr)-OH缩合得到N-Fmoc保护的三肽((S)-2-{(2S，3R)-2-[(S)-2-(9H-Fluoren-9-ylmethoxycarbonylamino)-3-Tritylsulfanyl-Propiony lamino]-3-hydroxy-butyrylamino}-3-methyl-butyric Acid 2-Trimethylsilanyl-ethyl Ester)。然后N-Fmoc保护的三肽经烷基磺酰氯处理，其苏氨酸上的羟基形成烷基磺酸酯的离去集团，然后再用碱1，4-二氮杂二环[2.2.2]辛烷(DABCO)处理，经过消除反应，脱去离去基团，从而形成双键(Zdh)。然后再用Et₂NH处理，脱去Fmoc，形成三肽，之后三肽与Fmoc-D-Val-OH缩合得到Fmoc保护的四肽。此四肽经过四丁基氟化铵脱去TMSE基团，但此反应伴随着Fmoc的脱除，因此该方法之后用Fmoc-Cl再处理从而得到Fmoc保护的四肽((S)-2-((Z)-2-{(S)-2-[(R)-2-(9H-Fluoren-9-ylmethoxycarbonylamino)-3-methyl -butyrylamino]-3-tritylsulfanyl-propionylamino}-but-2-enoylamino)-3-methyl-butyric Acid)。

整个合成过程反应式如下：