[发明专利]一种以沼液为基础培养基发酵生产生物有机肥的方法

权利要求书

1.一种以沼液为基础培养基发酵生产生物有机肥的方法，其特征在于主要包括如下方法步骤：

（1）、配制发酵培养基：每1000mL沼液与包括下述重量份的组份配成液体，即得发酵培养基：玉米粉10～15g、豆粕10～25g、磷酸二氢钾1～2g、碳酸钙15～20g、硫酸镁0.5～1g、硫酸铵1～2g、甘氨酸0.5～1g、氯化钠1.5～2.5g、硝酸钾2～4g，将上述发酵培养基灭菌后备用；

（2）、将枯草芽孢杆菌划线于NA 营养琼脂培养基试管斜面上，在28～30℃培养箱中培养16h～24h，得到备用的斜面菌种；

（3）、用接种环挑取（2）步骤中得到斜面菌种单菌落，接种于装有SDAY 培养基的三角瓶中，进行摇瓶培养，SDAY 培养基的装液量为三角瓶体积的20％～50％，在28～30℃下180～200r/min 振荡培养16～24h，得到一级种子液；

（4）、将上述培养的一级种子液接入装有SDAY 培养基的三角瓶，接种量为SDAY 培养基3～5％ (v/v)，SDAY 培养基的装液量为三角瓶体积的20％～50％，在28℃～30℃下180～200r/min 振荡培养16h～24h，得到二级种子液；

（5）、种子罐培养：在搅拌式发酵罐内加入备用的发酵培养基，发酵培养基的装液量为发酵罐体积的50％～60％，0.09～0.11％(w/v) 消泡剂，按5％～10％的接种量接入培养好的二级种子液，在28℃～30℃下通气量3～5L/min，罐压60～80kPa，搅拌转速180～200r/min 条件下培养，培养时间控制为16h～24h，得到三级种子液；

（6）、发酵罐培养：在搅拌式发酵罐内加入备用的发酵培养基，发酵培养基的装液量为发酵罐体积的50％～60％，0.09～0.11％ (w/v) 消泡剂，按8～10％接入三级种子液，在28～30℃下通气量8～10L/min，罐压60～80kPa，搅拌转速180～220r/min条件下，发酵50h～72h，即可得到生物有机肥。

2.如权利要求1所述的以沼液为基础培养基发酵生产生物有机肥的方法，其特征在于所述发酵培养基配制组份中的玉米粉用淀粉、葡萄糖、蔗糖中的一种或几种替换。

3.如权利要求1所述的以沼液为基础培养基发酵生产生物有机肥的方法，其特征在于所述配制发酵培养基组份中的豆粕用酵母浸膏、蛋白胨中的一种或两种所替换。

4.如权利要求1、2或3所述的以沼液为基础培养基发酵生产生物有机肥的方法，其特征在于得到生物有机肥后，用显微镜检查到有10～30％的芽胞囊破裂后，便可放罐，得到的生物有机肥中枯草芽孢杆菌的有效活菌数>10¹²cfu/ml达到合格。