[发明专利]一种适合松茸发酵的液体培养基

说明书

技术领域

本发明属于农业技术，具体涉及松茸丝体的培养基。

背景技术

松茸，属担子菌亚门、层菌纲、伞菌目、口蘑科、口蘑属，是世界上名贵的野生食用菌。松茸属于外生菌根菌，它和松属、栎属中的一些植物的根形成营养共生关系，对于环境的要求很严格，关于诱导松茸人工菌根苗的报导有许多，但形成的菌根苗移栽后经常会出现退化现象，目前尚不能实现人工栽培，市场上出售的松茸为野生。近年来由于人们的掠夺式采集，松茸资源遭到严重破坏，并被列为国家二级保护物种。通过液体发酵获得的松茸菌丝体在气味和成分上与野生松茸很相近，并且发酵培养具有生产周期短，条件易控制等优点，用液体发酵的方式生产松茸菌丝体，并将其提取物应用于食品、化妆品行业中具有很大的开发前景，同时还有利于对松茸的保护。现有的液体培养基松茸菌丝体产量低于20g/L，提高单位体积培养基菌丝体的产量，仍有较大空间。

发明内容

本发明的目的是提供一种适合松茸发酵的液体培养基，用于获得松茸菌丝体的人工生产，克服现有的液体培养基产量偏低的不足

本发明的液体培养基依每升培养基含葡萄糖20g、酵母膏0.3g、蛋白胨0.5g、麦精0.3g、硫酸镁0.05g、磷酸二氢钾0.1g、可溶性淀粉40g，其余为水的比例混合。再用3％醋酸调pH至5.5即得

培养基使用方法

将松茸菌种在PDA固体培养基上培养30d，培养温度为22℃。然后将固体平板上的松茸菌丝体接种到装有100ml液体培养基的锥形瓶(500ml)中，静置培养一个月，培养温度为22℃。

将容积为5L的发酵罐高压灭菌，在无菌的条件下将灭菌后的体积为3L的液体培养基加入到发酵罐中，并将300ml菌种接入到发酵罐中，通入经过0.45μm的无菌滤膜过滤的空气进行培养，发酵时在培养基中加入1.5ml消泡剂，防止泡沫的产生。设置发酵罐转速为50r/min，通气率0.3cm/s，然后进行发酵培养。

本发明的积极效果是：培养基中选定了可溶性淀粉的最佳含量，提高了单位体积培养基松茸菌丝体的生物量，

实验中，培养结束后，用尼龙布过滤菌丝体，将得到的松茸菌丝体先用自来水冲洗两次，再用蒸馏水冲洗两至三次，将菌丝体冷冻干燥(-45℃，18h)后称量菌丝体的质量，发酵产量达到目前最高水平22g/L，可见本发明液体培养基适合松茸的发酵培养。为松茸菌丝的规模化生产和利用提供一定依据。

具体实施方式

取葡萄糖20g、酵母膏0.3g、蛋白胨0.5g、麦精0.3g、硫酸镁0.05g、磷酸二氢钾0.1g、可溶性淀粉40g混合，加无菌水至1升，用3％醋酸调pH至5.5得1升量的本发明液体培养基。