[发明专利]催化阿糖胞苷酯合成反应的细菌细胞催化剂的制备方法有效
申请号: | 201110130830.2 | 申请日: | 2011-05-20 |
公开(公告)号: | CN102250785A | 公开(公告)日: | 2011-11-23 |
发明(设计)人: | 李晓凤;卢志洪;余以刚;吴晖;赵光磊 | 申请(专利权)人: | 华南理工大学 |
主分类号: | C12N1/20 | 分类号: | C12N1/20;C12P19/38;C12R1/025;C12R1/05;C12R1/06;C12R1/39;C12R1/24 |
代理公司: | 广州粤高专利商标代理有限公司 44102 | 代理人: | 何淑珍 |
地址: | 510640 广*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 催化 阿糖胞苷 合成 反应 细菌 细胞 催化剂 制备 方法 | ||
1. 一种催化阿糖胞苷酯合成反应的细菌细胞催化剂的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
1)细菌种子液接种至含产酶诱导剂的液体培养基中,接种量为0.2%~18% v/v,培养条件为15℃~60℃,培养时间为6~192h;
2)离心后收集菌体,蒸馏水或缓冲液洗涤两次,经真空冷冻干燥12h以上收获菌体干粉,即为细菌细胞催化剂。
2. 根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,所述细菌包括无色短杆菌(Achromobacter xylosoxidans subsp)、产碱杆菌(Alcaligenes faecalis)、芽孢杆菌(Bacillus cereus)、节杆菌(Arthrobacter simplex)、假单胞菌(Pseudomonas fluorescens)或乳杆菌(Lactobacillus brevis)。
3. 根据权利要求1或2所述的制备方法,其特征在于,所述液体培养基成分为:0. 1~100 g/L产酶诱导剂,0.1~50 g/L有机氮源,0.1~10 g/L MgSO4·7H2O,5 g/L (NH4)2SO4,1 g/L K2HPO4,pH为6.8~7.5。
4.根据权利要求3所述的制备方法,其特征在于,所述产酶诱导剂包括糖类化合物、饱和植物油脂、不饱和植物油脂、脂肪酸、Tween系列或Span系列中的一种或两种。
5.根据权利要求3中所述的制备方法,其特征在于,所述有机氮源包括牛肉膏、酵母膏、蛋白胨、胰蛋白胨、干酪素、酸水解酪蛋白胨或无氨基酵母膏中的一种或两种。
6.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,所述缓冲液为pH 5.0~9.0的缓冲液。
7. 根据权利要求6所述的制备方法,其特征在于,所述缓冲液为pH 5.0~9.0,1/15mol/L的Na2HPO4/KH2PO4缓冲液。
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