[发明专利]一种抗菌肽B及其应用

说明书

技术领域

本发明涉及一种抗菌肽，尤其涉及一种具有显著抑菌活性的抗菌肽B及其应用。

背景技术

目前，由于抗菌药物的广泛使用，使多数的常规抗生素都出现了相应的耐药性致病株系，因而寻找全新类型的抗菌药物成为解决耐药性问题的又一课题。

抗菌肽是对多种微生物、病毒、原虫甚至癌细胞都有明显抑杀作用的小分子多肽，广泛存在于生物体内。与抗生素不同，抗菌肽是特定基因编码的产物，它通过破坏细胞膜通透性使细胞内容物外流，最终导致细菌死亡，其抑菌过程中细菌不易产生耐药性，因此抗菌肽非常有望成为替代抗生素的新型抗菌药物。

近年来，多肽在人体中的作用已越来越多的被科学界发现，其产生的医药效果也引起了人们的高度重视。因此，开发具有诊断、监测、预防和治疗药作用的多肽药物的研究成为迫切任务。

发明内容

本发明的目的是提供一种具有显著抑菌活性的抗菌肽B及其应用。

本发明所述的抗菌肽B，其氨基酸序列是SEQ ID NO.1所示的序列；所述氨基酸序列具体信息是：

(a)序列特征

*长度：17氨基酸

*类型：氨基酸

*链型：单链

*拓扑结构：线性

(b)分子类型：蛋白质

(c)序列描述：

Leu Val Val Ala Gly Lys Ile Ala Ala Ile Gly Ile Lys Lys Ile Gly Lys。

本发明提供的抗菌肽B不需任何修饰连接，且人工合成方便；试验证明具有显著的抑菌功能，同时对正常细胞无毒性。

本发明所述抗菌肽B在制备抗菌药物中的应用。

功能实验显示：本发明所述抗菌肽B抗菌谱很广，无论是G⁺菌(革兰氏阳性菌)、还是G菌(革兰氏阴性菌)，都能被它很好地抑制，而且对真菌的抑制作用也很明显。提示其在抗菌药物开发和应用方面有重要价值。

进一步的功能实验显示：本发明的抗菌肽B对细菌的抑制作用在10min之内就开始发挥，20min后抑制率即可达80％，45min后就可达到95％以上。

鉴于上述多肽的性质和功能，本领域普通技术人员可以利用分子生物学技术，根据氨基酸与密码子的对应关系反推出核酸序列作为功能基因，用于制备转基因动物、植物或工程菌以表达功能蛋白，并用于药物的开发和临床治疗。

具体实施方式

实施例1

本发明所述抗菌肽B的设计与合成

1、依据目前国际主要抗菌肽数据库(http://www.imtech.res.in/raghava/antibp/；http://aps.unmc.edu/AP/main.php；http://www.bbcm.univ.trieste.it/；http://penbase.immunaqua.com/)中登陆的抗菌肽的序列，分析其一级结构与活性的关系的对应关系，设计人工多肽序列。

2、利用蛋白质分析数据库http://www.expasy.org/分析已知活性的多肽序列与设计的多肽序列的二级结构的相似度，结合其它物理化学参数预测进行设计序列的修正。

3、将设计的人工多肽序列(抗菌肽)送至生物公司合成或利用自动多肽合成仪合成序列。HPLC检测纯度要大于96％，同时通过质谱检测确定多肽合成质量。样品以冻干状态保存。

4、合成后的多肽进行抑菌功能检测筛选。

5、通过功能检测，最终获得具有抑菌功能的多肽序列——抗菌肽B，其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。

实施例2

利用液体生长抑制法检测本发明所述抗菌肽B的抑菌活性

2.1材料、试剂

1)本发明所述抗菌肽B由上海生工生物工程技术服务有限公司合成，氨苄青霉素(Amp)为solarbio公司产品，一次性滤器，为美国PALL公司产品，其它药品试剂为国产分析纯。