[发明专利]用于治疗视网膜变性病的改良模式

权利要求书

1.用于治疗或预防视网膜变性的方法，包括使用选自下组细胞中的至少一种：RPE细胞、RPE样细胞、由哺乳动物胚胎干细胞衍生的RPE或RPE样祖细胞。

2.权利要求1的方法，其中视网膜变性状况选自下组中的至少一种：色素性视网膜炎和黄斑变性。

3.权利要求1的方法，还包括通过玻璃体切割术将细胞移植到眼球的视网膜下空间中。

4.权利要求3的方法，其中细胞在悬浮液、基质、或基底中进行移植。

5.权利要求2的方法，其中色素性视网膜炎与动物模型有关。

6.权利要求5的方法，其中动物模型选自下组：rd小鼠、RPE-65敲除小鼠、矮胖样小鼠、RCS大鼠、阿比西尼亚猫、视锥变性“cd”犬、进行性视杆-视锥变性“prcd”犬、早期视网膜变性“erd”犬、视杆-视锥发育异常1、2和3“rcd1、rcd2和rcd3”犬、光受体发育异常“pd”犬、和Briard“RPE-65”犬。

7.权利要求6的方法，其中使用行为测试、荧光血管造影术、组织学、和功能测试诸如测量细胞进行吞噬(光受体片段)的能力、维生素A代谢、紧密接头传导性、或使用电子显微镜的评估其中一项或多项来评估动物模型的治疗效果。

8.用于使hES细胞自发分化成RPE细胞、RPE样细胞、或RPE祖细胞的方法，所述方法包括：

a)使hES细胞培养物在MEF上过度生长；

b)使hES细胞培养物形成厚厚的多层细胞；

c)培养hES细胞；

d)由得到的细胞培养物分离并培养有色RPE细胞、REP样细胞、和/或RPE祖细胞。

9.权利要求8的方法，其中分离并培养RPE样细胞包括：

a)用酶消化培养的hES细胞或EB′s；

b)选择性分离有色细胞；

c)将分离的细胞平板接种在明胶或层粘连蛋白上培养1-2天以形成原代培养物(P0)；

d)将原代培养物继续培养至多达3周的一段时间；和

e)分离RPE样细胞。

10.权利要求9的方法，其中酶选自下组中的一种或多种：胰蛋白酶、胶原酶、和分散酶。

11.权利要求8的方法，其中培养RPE细胞以建立新的RPE细胞系。

12.权利要求11的方法，其中RPE细胞系分化成交替谱系，包括在培养中用bFGF或FGF处理RPE细胞系。

13.权利要求11的方法，其中在RPE样细胞衍生自不同ES细胞系时，新的RPE细胞系因至少一种选自下组的特征与早已建立的RPE细胞系不同：生长速率、色素表达、在培养中去分化、和在培养中再分化。

14.用于使RPE系或RPE细胞前体衍生成具有增加的预防新血管生成能力的RPE细胞的方法，所述方法包括：

a)使来自动物的体细胞老化，使得端粒酶缩短，其中细胞已经度过了至少10％的正常复制寿命；和

b)使用体细胞作为核移植供体细胞以生成过度表达血管发生抑制物的细胞，其中血管发生抑制物可以是色素上皮衍生因子(PEDF/EPC-1)。

15.权利要求14的方法，其中用抑制新血管生成的外源基因遗传修饰体细胞。

16.权利要求8的方法，其中RPE样细胞衍生自HLA区纯合性ES或胚胎衍生细胞库使得ES衍生细胞具有降低的HLA抗原复杂性。

17.权利要求8的方法，其中ES细胞衍生自人。

18.用于治疗帕金森氏病的方法，包括移植RPE样细胞或祖细胞。