[发明专利]辅助鉴定猪遗传稳定性相关基因的专用引物及其应用无效
申请号: | 201110133123.9 | 申请日: | 2011-05-20 |
公开(公告)号: | CN102181571A | 公开(公告)日: | 2011-09-14 |
发明(设计)人: | 常智杰;甘一迪;任芳丽;王银银;窦琳;夏永静;张诚;韩斌 | 申请(专利权)人: | 清华大学 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68;C12N15/11 |
代理公司: | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人: | 关畅 |
地址: | 100084*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 辅助 鉴定 遗传 稳定性 相关 基因 专用 引物 及其 应用 | ||
1.辅助鉴定猪遗传稳定性相关基因的专用引物,包括p53引物对;所述p53引物对由序列表的序列1所示DNA和序列表的序列2所示DNA组成。
2.如权利要求1所述的专用引物,其特征在于:所述专用引物还包括p21引物对、chek1引物对、atm引物对、cdk1引物对和helb引物对中的至少一种;所述p21引物对由序列表的序列3所示DNA和序列表的序列4所示DNA组成;所述chek1引物对由序列表的序列5所示DNA和序列表的序列6所示DNA组成;所述atm引物对由序列表的序列7所示DNA和序列表的序列8所示DNA组成;所述cdk1引物对由序列表的序列9所示DNA和序列表的序列10所示DNA组成;所述helb引物对由序列表的序列11和序列表的序列12所示DNA组成。
3.如权利要求2所述的专用引物,其特征在于:所述专用引物由所述p53引物对、所述p21引物对、所述chek1引物对、所述atm引物对、所述cdk1引物对和所述helb引物对组成。
4.如权利要求1至3中任一所述的专用引物,其特征在于:所述猪遗传稳定性相关基因为p53基因、p21基因、chek1基因、atm基因、cdk1基因和helb基因中的至少一个;所述p53基因如序列表的序列13所示;所述p21基因如序列表的序列14所示;所述chek1基因如序列表的序列15所示;所述atm基因如序列表的序列16所示;所述cdk1基因如序列表的序列17所示;所述helb基因如序列表的序列18所示。
5.权利要求1至4中任一所述的专用引物在辅助鉴定猪遗传稳定性相关基因中的应用。
6.如权利要求5所述的应用,其特征在于:所述猪遗传稳定性相关基因为p53基因、p21基因、chek1基因、atm基因、cdk1基因和helb基因中的至少一个;所述p53基因如序列表的序列13所示;所述p21基因如序列表的序列14所示;所述chek1基因如序列表的序列15所示;所述atm基因如序列表的序列16所示;所述cdk1基因如序列表的序列17所示;所述helb基因如序列表的序列18所示。
7.一种辅助鉴定猪遗传稳定性相关基因的方法,包括如下步骤:
以待测猪的cDNA为模板,用权利要求1至3中任一所述专用引物中的每个引物对分别进行PCR扩增,根据PCR扩增产物辅助鉴定猪遗传稳定性相关基因;所述猪遗传稳定性相关基因为p53基因、p21基因、chek1基因、atm基因、cdk1基因和helb基因中的至少一个;所述p53基因如序列表的序列13所示;所述p21基因如序列表的序列14所示;所述chek1基因如序列表的序列15所示;所述atm基因如序列表的序列16所示;所述cdk1基因如序列表的序列17所示;所述helb基因如序列表的序列18所示。
8.如权利要求7所述的方法,其特征在于:所述p53引物对用于辅助鉴定所述p53基因,其目的PCR扩增产物为474bp;所述p21引物对用于辅助鉴定所述p21基因,其目的PCR扩增产物为356bp;所述chek1引物对用于辅助鉴定所述chek1基因,其目的PCR扩增产物为353bp;所述atm引物对用于辅助鉴定所述atm基因,其目的PCR扩增产物为532bp;所述cdk1引物对用于辅助鉴定所述cdk1基因,其目的PCR扩增产物为598bp;所述helb引物对用于辅助鉴定所述helb基因,其目的PCR扩增产物为491bp。
9.如权利要求7或8所述的方法,其特征在于:所述PCR扩增的反应体系为:ddH2O17μl,10×PCR Buffer 2.5μl,2.5mM dNTP 2μl,10μmol/L的每条引物各0.5μl,cDNA 2μl,2.5U/μL Taq polymerase 0.5μl。
10.如权利要求7至9中任一所述的方法,其特征在于:所述PCR扩增的反应参数为:94℃5min;94℃30s、60℃30s、72℃40s,30个循环;72℃5min。
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