[发明专利]一种模拟人盆腔炎动物模型的制作方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种模拟人盆腔炎动物模型的制作方法。

背景技术

盆腔炎是指女性内生殖器官及周围的结缔组织、盆腔腹膜发生炎症。它包括子宫内膜炎、子宫肌炎、输卵管炎、卵巢炎等。盆腔炎为妇科常见病、难治病。严重者可引起败血症及脓毒血症。如不及时控制，可出现感染性休克甚至死亡。亦可能导致月经失调，甚至不孕。其发病率不断增高。临床研究表明盆腔炎常见的致病因子为细菌（包括需氧菌和厌氧菌），也有病毒、霉菌、支原体、衣原体等。目前盆腔炎动物模型与人疾病发生机制不吻合，发病机制不清，严重阻碍治疗盆腔炎药物的开发与研究。目前公开的盆腔炎动物模型有以下几种：

一、子宫内膜炎模型

1. 苯酚胶浆剂致大鼠子宫内膜炎模型：苯酚胶浆是化学腐蚀烧伤剂。将大鼠麻醉后，下腹常规消毒后正中切口，暴露子宫，于子宫分叉处进针入子宫腔内，朝卵巢方向缓慢推入25 %苯酚胶浆0.05 mL/只，然后分层缝合关腹，子宫病理学检查发现与炎症反应相似，可见子宫腔闭塞黏连，上皮细胞坏死脱落，大量炎症细胞浸润。

2. 盐酸致大鼠子宫内膜炎模型：将大鼠麻醉后，行腹正中线切口，暴露子宫，用镊子夹住双角子宫分叉处的一侧，在同侧子宫近卵巢端进针，向子宫腔内注射0.2 M盐酸，以管腔充盈为度，维持2.5 min后松开镊子，另一侧相同。双侧子宫注射完毕后，逐层关腹。子宫病理学检查发现在子宫内膜黏膜少量炎症细胞浸润。一周后炎症细胞浸润增多。

3. 异物致大鼠子宫内膜炎模型：将大鼠麻醉后，开腹暴露子宫，沿左侧子宫角上1cm处作一横切口，将一塑料管放在子宫内，缝合固定以防脱落。病理观察到少量炎症细胞。

然而以上两种方法通过化学烧伤、腐蚀或异物致炎，方法过于强烈，同人盆腔炎发生的自然过程不符合。

4. 大鼠大肠杆菌感染性子宫内膜炎模型：将大鼠麻醉后，无菌条件下取腹部正中切口，开腹暴露子宫，用1mL注射器抽取0.2mL大肠杆菌液，于子宫内进针，在注射前先用注射器机械损伤子宫内膜组织，然后注入菌液0.08～0.1mL，逐层关腹。病理学检查发现造模感染第3 d，黏膜出现化脓灶，第5 d，子宫右侧积液，充血水肿。第60 d，盆腔出现广泛黏连不易分离。病理切片发现大量炎性细胞浸润。该方法与手术过程中感染产生的盆腔炎较为接近，然而同现实中的手术操作条件不相吻合，动物死亡率高，不适用于药物筛选与机理研究。

5. 兔细菌感染性子宫内膜炎模型：将致病性大肠杆菌，金黄色葡萄球菌和无乳链球菌等比例混合。用导尿管通过子宫灌注并结合一定的损伤。隔天一次，共三次。发现造模后兔精神变差、采食量减少，阴门肿胀，流出脓性分泌物；每次灌注细菌后8 h内体温升高0.5 ℃左右，血液中性粒细胞的比例升高；子宫分泌物中混有大量白细胞、脓球和少量脱落的子宫内膜上皮细胞；子宫显著肿大，子宫内膜溃疡和出血，上皮结构不完整，细胞变性、坏死，微绒毛和纤毛脱落，上皮下出血、瘀血、水肿和炎性细胞浸润。该方法同临床更为接近，但是导尿管损伤过于剧烈，且兔子体型较大，洁净级兔成本较高，不适用于药物研究。

二、输卵管炎模型

1. 苯酚胶浆剂致大鼠输卵管炎模型：将大鼠麻醉后，开腹暴露两侧输卵管，各注射25 %苯酚胶浆0.1 mL，缝合。20 d后，大鼠全血黏度升高，输卵管阻塞。该法于临床疾病发生不吻合。

2. 兔溶血性链球菌感染性输卵管炎模型：新西兰白兔，麻醉后，打开腹膜暴露子宫、输卵管，用动脉夹将输卵管峡部端、伞端夹住，由峡部端向伞端注射β-溶血性链球菌菌液（1.5亿菌落/mL）0.4 mL/侧。1 min后松开动脉夹，关腹。血液观察发现血沉压积异常，输卵管阻塞，盆腔黏连。

3. 大鼠细菌感染性输卵管炎模型：麻醉开腹，在子宫角近输卵管处进针，朝输卵管侧注射0.05 mL混合菌液（致病性大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、无乳链球菌，菌液体积比为2∶1∶1。感染后3～12 d，感染组大鼠子宫显著增重。感染后第9 d，感染大鼠子宫出现化脓；感染前期可见子宫内膜上皮细胞脱落，黏膜层水肿、充血、出血，炎症细胞浸润；感染后期可见肌层增厚等病变。

以上两种方法同临床盆腔炎发生也不相同，且手术难度较大，阻碍模型的应用。

发明内容

本发明的目的是建立一种操作简单可行，材料容易得到，对操作者无特殊技术要求，模型制作成功率高，模拟人盆腔炎发生的动物模型的制作方法。