[发明专利]一种羌活种子和宽叶羌活种子的快速鉴别方法有效
申请号: | 201110135374.0 | 申请日: | 2011-05-24 |
公开(公告)号: | CN102539597A | 公开(公告)日: | 2012-07-04 |
发明(设计)人: | 蒋舜媛;丁立生;徐凯节;周毅;张艳侠;孙辉;周燕;王建;张磊 | 申请(专利权)人: | 四川省中医药科学院;四川诺托璞生态药材有限公司 |
主分类号: | G01N30/88 | 分类号: | G01N30/88 |
代理公司: | 成都天嘉专利事务所(普通合伙) 51211 | 代理人: | 赵丽 |
地址: | 610041 四川*** | 国省代码: | 四川;51 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 羌活 种子 快速 鉴别方法 | ||
1.一种羌活种子和宽叶羌活种子的快速鉴别方法,其特征在于:以至少包括异欧前胡素、珊瑚菜内酯、异戊烯基伞形花内酯、水合氧化前胡素 、香叶木素、佛手柑内酯、(–)-氧化前胡素、紫花前胡苷、佛手酚–O–β–D–葡萄糖苷、伞形花内酯、阿拉善苷C和犬尿喹酸在内的12种化合物为特征对照品,采用高效液相色谱电喷雾质谱法对不同来源的羌活种子和宽叶种子样品进行定性定量分析,并与12种特征对照品进行比较,得出不同来源的羌活种子和宽叶羌活种子样品的共有成分及区别性成分,并运用聚类分析法建立羌活种子和宽叶羌活种子的标准主成分分析模型,通过标准主成份分析模型得到的结果实现对待测的羌活种子或宽叶羌活种子的快速鉴别。
2.根据权利要求1所述的快速鉴别方法,其特征在于具体鉴别步骤如下:
(1)选取来源确切的羌活种子和宽叶羌活种子标准样品;
(2)配制12种特征对照品溶液,建立该12种特征对照品的高效液相色谱电喷雾质谱图;
(3)采用高效液相色谱电喷雾质谱法对已知的不同来源的羌活种子和宽叶种子样品进行定性定量分析,得到已知来源羌活种子和宽叶羌活种子的高效液相色谱电喷雾质谱图;
(4)将步骤(3)所得到的已知来源羌活种子和宽叶羌活种子的高效液相色谱电喷雾质谱图与步骤(2)得到的12种特征对照品的高效液相色谱电喷雾质谱图进行比较,得出羌活种子和宽叶羌活种子样品的共有成分及区别性成分;
(5)对步骤(3)所得到的已知来源的羌活种子和宽叶羌活种子的高效液相色谱电喷雾质谱图用聚类分析法建立羌活种子和宽叶羌活种子的标准主成分分析模型;
(6)采用高效液相色谱电喷雾质谱法对待测种子进行定性定量分析,将分析得到的结果与步骤(5)得到的标准主成分分析模型进行比对,快速鉴定待测种子的真实性。
3.根据权利要求2所述的快速鉴别方法,其特征在于:步骤(1)中所述已知来源的羌活种子和宽叶羌活种子标准样品分别为伞形科羌活属植物羌活Notopterygium incisum Ting ex H. T. Chang和宽叶羌活Notopterygium franchetii deBoiss.的种子。
4.根据权利要求2所述的快速鉴别方法,其特征在于:步骤(1)中所述已知来源的羌活种子和宽叶羌活种子标准样品分别至少为30个。
5.根据权利要求2所述的快速鉴别方法,其特征在于:建立步骤(2)中所述该12种特征对照品的高效液相色谱电喷雾质谱图过程如下:
首先,配制特征对照品溶液:分别精密称取12种特征对照品适量,加入甲醇,分别配制成每1mL甲醇含1mg特征对照品的溶液;
然后,分别精密吸取以上12种特征对照品溶液各20μL注入高效液相色谱电喷雾质谱联用仪,采用高效液相色谱电喷雾质谱法对12种特征对照品溶液进行测定,得到12种特征对照品的高效液相色谱电喷雾色谱图。
6.根据权利要求2所述的快速鉴别方法,其特征在于:建立步骤(3)中所述已知来源羌活种子和宽叶羌活种子的高效液相色谱电喷雾质谱图过程如下:
首先,按照20目-90目粉碎,精密称取已知来源羌活种子和宽叶羌活种子适量,浸泡在浓度为50%-100%的甲醇中,得到每20mL甲醇含0.5g的供试样品溶液10ml-50ml,超声提取20min-60min,过滤得第一次滤渣,第一次滤渣继续加入同样体积同样浓度的甲醇,超声提取20min-60min,过滤得第二次滤渣,第二次滤渣继续加入同样体积同样浓度的甲醇,超声提取20min-60min,合并滤液,减压浓缩,定容到10ml-100ml容量瓶中,取2mL样品溶液用0.45 μm微孔滤膜滤过,配制完成;
然后,精密吸取供试样品溶液20μL,采用高效液相色谱电喷雾质谱法进行测定,得到供试样品的高效液相色谱电喷雾质谱图。
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