[发明专利]一种检测多种高致病性病原细菌的方法和试剂盒有效
申请号: | 201110137547.2 | 申请日: | 2011-05-24 |
公开(公告)号: | CN102796810A | 公开(公告)日: | 2012-11-28 |
发明(设计)人: | 谭畅;王勤熙;张秀斐;姚见儿 | 申请(专利权)人: | 上海透景生命科技有限公司 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68;C12Q1/14;C12Q1/04;C12N15/11 |
代理公司: | 上海一平知识产权代理有限公司 31266 | 代理人: | 祝莲君;王昕 |
地址: | 201203 上海市浦东*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 检测 多种 致病性 病原 细菌 方法 试剂盒 | ||
1.一种聚合酶链式反应方法,其特征在于,它包括步骤:
(a)在聚合酶反应体系中进行聚合酶链式反应,从而获得扩增产物,其中所述的反应体系中含有特异性扩增至少5种高致病性病原菌的扩增产物的特异性引物集,其中所述的高致病性病原菌选自:炭疽芽胞杆菌、鼠疫耶氏菌、肉毒梭菌、布鲁氏菌、猪链球菌、霍乱弧菌、土拉弗菌、鼻疽假单胞菌(或类鼻疽假单胞菌)、贝纳柯克斯体、嗜肺军团菌。
2.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述的扩增高致病性病原菌的特异性引物集包括:SEQ ID NO.:1、24、25或26所示核苷酸序列的上游引物和SEQ ID NO.:2、27、28或28所示核苷酸序列的下游引物。
3.如权利要求1所述的方法,其特征在于,还包括步骤:
(b)对步骤1获得的扩增产物用高致病性病原菌的特异性探针进行检测。
4.如权利要求3所示的方法,其特征在于,所述的探针的5’端或3’端具有NH2-间隔臂;或者所述的探针通过“-NH-间隔臂”结合于微球或固相载体。
5.一种引物集,其特征在于,所述的引物集可特异性扩增至少5种高致病性病原菌的扩增产物,其中所述的高致病性病原菌选自:炭疽芽胞杆菌、鼠疫耶氏菌、肉毒梭菌、布鲁氏菌、猪链球菌、霍乱弧菌、土拉弗菌、鼻疽假单胞菌(或类鼻疽假单胞菌)、贝纳柯克斯体、嗜肺军团菌。
6.如权利要求5所述的引物集,其特征在于,所述的引物集包括:
上游引物:所述上游引物含有SEQ ID NO.:1、24、25或26所示核苷酸序列;和
下游引物:所述下游引物含有SEQ ID NO.:2、27、28或28所示核苷酸序列。
7.如权利要求5所述的引物集,其特征在于,所述的引物集包括:SEQ ID NO.:1、24、25或26所示核苷酸序列的上游引物和SEQ ID NO.:2、27、28或28所示核苷酸序列的下游引物。
8.一种检测试剂盒,其特征在于,它包括:第一容器以及位于所述容器内权利要求5所述的引物集。
9.如权利要求8所述的试剂盒,其特征在于,所述的试剂盒还包括:第二容器以及位于所述容器内的核酸探针。
10.如权利要求5所述的引物集的用途,其特征在于,用于制备检测高致病性病原菌的试剂盒。
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