[发明专利]用于水溶性固定化纤维素酶的pH敏感再生型聚合物及其制备方法与应用

权利要求书

1.一种用于水溶性固定化纤维素酶的pH敏感再生型聚合物，其特征在于，所述的用于水溶性固定化纤维素酶的pH敏感再生型聚合物的粘均分子量为1.04×10⁴，由甲基丙烯酸、甲基丙烯酸二甲氨基乙酯和甲基丙烯酸丁酯经无规共聚而得到，其中所述甲基丙烯酸、所述甲基丙烯酸二甲氨基乙酯和所述甲基丙烯酸丁酯的投料摩尔比为19∶1∶1。

2.一种制备根据权利要求1所述的用于水溶性固定化纤维素酶的pH敏感再生型聚合物的方法，其特征在于，将所述甲基丙烯酸、甲基丙烯酸二甲氨基乙酯和所述甲基丙烯酸丁酯按投料摩尔比19∶1∶1加入溶剂中，再加入引发剂，在惰性气体存在下进行聚合反应得到。

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述溶剂为去离子水，所述引发剂为亚硫酸氢钠和过硫酸铵，所述惰性气体为氮气，所述聚合反应在55℃的温度、转速为180rpm的条件下振荡反应24小时而实现。

4.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述的方法还包括以下后续步骤：分别用无水乙醇洗涤所述聚合反应得到的用于水溶性固定化纤维素酶的pH敏感再生型聚合物，再将其分散于去离子水中，加入氢氧化钠，磁力搅拌充分溶解，过滤处理除去不溶的聚合物，将得到的澄清的聚合物溶液的pH值调节至等电点，离心得到沉淀，室温下真空干燥，得到所述的用于水溶性固定化纤维素酶的pH敏感再生型聚合物的纯品。

5.一种可逆溶解固定化纤维素酶，其特征在于，采用根据权利要求1所述的用于水溶性固定化纤维素酶的pH敏感再生型聚合物固定化纤维素酶而得到。

6.根据权利要求5所述的可逆溶解固定化纤维素酶，其特征在于，所述固定化通过水溶性碳化二亚胺为交联剂，采用共价结合法实现。

7.根据权利要求5所述的可逆溶解固定化纤维素酶，其特征在于，所述固定化的具体过程为：将所述的用于水溶性固定化纤维素酶的pH敏感再生型聚合物均匀地分散于去离子水中，逐步调节pH至碱性并搅拌，待所述的用于水溶性固定化纤维素酶的pH敏感再生型聚合物完全溶解后调节pH至6.0，加入交联剂水溶性碳化二亚胺，室温下活化10～15min，然后加入纤维素酶酶液，室温下缓慢搅拌进行固定，反应结束调节pH至3.5～3.6，离心去上清液得到沉淀，即为所述可逆溶解固定化纤维素酶。

8.一种pH-热敏感再生型两水相体系，其特征在于，包括热敏感成相聚合物，以及根据权利要求1所述的或权利要求2～4任一所述的方法制备的用于水溶性固定化纤维素酶的pH敏感再生型聚合物或根据权利要求5～7任一所述的可逆溶解固定化纤维素酶。

9.根据权利要求8所述的pH-热敏感再生型两水相体系，其特征在于，所述热敏感成相聚合物是聚合物P_NB。

10.一种根据权利要求8或9的pH-热敏感再生型两水相体系在酶的催化反应中的应用。