[发明专利]一种蛋清源凝血酶抑制肽的纯化方法

权利要求书

1.一种纯化蛋清源凝血酶抑制肽的方法，采用凝胶柱色谱和半制备高效液相色谱联用的方法对蛋清源凝血酶抑制肽进行纯化，其特征在于凝胶柱色谱和半制备高效液相色谱纯化条件的建立。

2.根据权利1所述的蛋清源凝血酶抑制肽的纯化方法，其特征在于所述的凝胶柱色谱纯化条件的建立：依据样品不同组分分子量不同进行纯化，具体步骤为：蒸馏水溶胀凝胶，加热煮沸除去气泡，装柱至所需高度，用缓冲液平衡，上样，洗脱，并用记录仪记录洗脱曲线至紫外检测器检测不到吸收为止，分段收集洗脱液，按先后顺序排列，分别旋转蒸发，冷冻干燥后进一步纯化并留样检测活力。

3.根据权利1所述的蛋清源凝血酶抑制肽的纯化方法，其特征在于所述的半制备高效液相色谱纯化条件的建立，其特征在于不同组分的疏水性，采用C4或者C18柱，柱温25-40℃，A相为三氟乙酸水溶液，B相为三氟乙酸乙腈溶液，用超滤膜过滤，超声脱气，以梯度洗脱的方式进行分离，流速在3～10mL/min条件下进样100～5000μL，通过紫外检测器检测，记录峰面积并据峰收集，经真空干燥后贮存。

4.根据权利2、3所述的蛋清源凝血酶抑制肽的纯化方法，通过抗凝活性实验发现该方法纯化的蛋清源凝血酶抑制肽具有较好的抗凝活性。