[发明专利]一种蛋白质稳定剂及其制备方法

说明书

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体的说，涉及一种保护蛋白质不会失活的蛋白质稳定剂及其制备方法。 

背景技术

蛋白质是一种具有复杂的空间立体结构的大分子物质,易受外界条件的影响发生变性。蛋白质稳定性与组成中的氨基酸种类有关系,例如含有巯基的氨基酸,最常见的是半胱氨酸,会降低蛋白质的稳定性,尤其在某些金属离子,Cu^2 + 、Zn^2 + 等存在时,蛋白质对空气中的氧更为敏感,而易发生不可逆变性。蛋白质活性的保存已经成为生物技术领域的重大难题。目前，蛋白质的长期保存一般用真空冷冻干燥方法保存，该保存方法的优点是，活性保存效果理想，保存时间长，但是存在缺点是操作繁琐，需要特殊的仪器，成本高，需要水做复溶剂等。 

发明内容

为解决以上技术问题，本发明目的之一在于提供一种成本低廉，能长时间保护蛋白质活性的保护剂。 

本发明目的之二在于提供一种蛋白质稳定剂的制备方法。 

本发明目的是这样实现的： 

一种蛋白质稳定剂按重量份数由下列原料组成：

pH值为7.2的磷酸盐缓冲液100份

    BSA（牛血清白蛋白）2～15份

蔗糖 1～8份

二硫苏糖醇0.1～1份

乙二胺四乙酸0.2～1.2份。

上述磷酸盐缓冲液按重量份数由磷酸氢二钠0.07～0.142份溶于100份纯化水中，配成溶液A；称取磷酸二氢钾0.068～0.136份溶于100份纯化水中，配成溶液B；用溶液B调溶液A至pH7.20制得。 

磷酸盐缓冲液保持溶液的酸碱度，使用BSA，蔗糖给蛋白“穿上”一层蛋白外衣尽量隔断目标蛋白与空气结合，二硫苏糖醇的加入是中和溶液中的氧化物杂质，乙二胺四乙酸的加入是去除溶液中的重金属离子，通过以上各组分的综合作用达到保护蛋白活性的目的。 

上述磷酸氢二钠0.07～0.142份。 

上述磷酸二氢钾0.068～0.136份。 

一种蛋白质稳定剂的制备方法，其特征在于按如下步骤进行： 

（1）称取磷酸氢二钠0.07～0.142份溶于100份纯化水中，配成溶液A；称取磷酸二氢钾0.068～0.136份溶于100份纯化水中，配成溶液B；用溶液B调溶液A至pH7.20，配成磷酸盐缓冲液；

（2）量取磷酸盐缓冲液 100份，称取BSA 2～15份，蔗糖 1～8份,二硫苏糖醇（DTT）0.1～1份，乙二胺四乙酸（EDTA）0.2-1.2份加入磷酸盐缓冲液中，搅拌均匀，得到蛋白稳定剂。

有益效果：本发明能长时间保护蛋白质活性，是一种非常好的蛋白质保护剂，且稳定剂组成成分常见，价格相对便宜，整个制备也比较方便，制备工序简单容易操作。 

具体实施方式

实施例

（1）称取磷酸氢二钠0.07克溶于100毫升纯化水中，配成溶液A；称取磷酸二氢钾0.068克溶于100毫升纯化水中，配成溶液B；用溶液B调溶液A至pH7.20，配成溶液C 

（2）量取溶液C 100毫升，称取BSA 2克，蔗糖 1克,二硫苏糖醇（DTT）0.1克，乙二胺四乙酸（EDTA）0.2克加入溶液C中，搅拌均匀，配成蛋白稳定剂；

实施例2

（1）称取磷酸氢二钠0.09克溶于100毫升纯化水中，配成溶液A；称取磷酸二氢钾0.08克溶于100毫升纯化水中，配成溶液B；用溶液B调溶液A至pH7.20，配成溶液C

（2）量取溶液C 100毫升，称取BSA 4克，蔗糖 2克,二硫苏糖醇（DTT）0.2克，乙二胺四乙酸（EDTA）0.4克加入溶液C中，搅拌均匀，配成蛋白稳定剂；

实施例3

（1）称取磷酸氢二钠0.1克溶于100毫升纯化水中，配成溶液A；称取磷酸二氢钾0.1克溶于100毫升纯化水中，配成溶液B；用溶液B调溶液A至pH7.20，配成溶液C

（2）量取溶液C 100毫升，称取BSA 5克，蔗糖 3克,二硫苏糖醇（DTT）0.3克，乙二胺四乙酸（EDTA）0.5克加入溶液C中，搅拌均匀，配成蛋白稳定剂；

实施例4

（1）称取磷酸氢二钠0.11克溶于100毫升纯化水中，配成溶液A；称取磷酸二氢钾0.11克溶于100毫升纯化水中，配成溶液B；用溶液B调溶液A至pH7.20，配成溶液C