[发明专利]一种从枸骨叶中提取3,4-二咖啡酰鸡纳酸的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种3,4-二咖啡酰鸡纳酸的制备方法，尤其是一种从植物中提取3,4-二咖啡酰鸡纳酸的制备方法。

背景技术

3,4-二咖啡酰鸡纳酸(4,5-Di-O-caffeoylquinic acid),分子式：C₂₅H₂₄O₁₂，分子量：516.457，CAS登录号：57378-72-0，主要存在于冬青科、忍冬科、菊科、蔷薇科多种植物中，其中冬青科植物枸骨Ilex cornuta Lindl.ex Paxt.叶中含量丰富。其分子式如下。

现代研究表明，3,4-二咖啡酰鸡纳酸具有抗血小板聚集、抗肿瘤、抗微生物、抗HIV、等多种作用，同时其也作为合成其它活性衍生物的原料。

冬青科植物枸骨Ilex cornuta Lindl.ex Paxt.叶作为中药苦丁茶使用。具有疏风清热、明目生津的功效。

现有技术中，尚没有适用于高纯度3,4-二咖啡酰鸡纳酸工业化大生产的制备工艺报道。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供一种利于大生产操作、产品纯度高的3,4-二咖啡酰鸡纳酸的制备方法。

 为解决上述技术问题，本发明采用下列技术方案。

取新鲜枸骨叶，加入其质量8-12倍质量的饱和石灰水浸泡24-72小时，压榨，滤过，浓缩，通过D101大孔吸附树脂吸附，水洗脱除杂，30-50%乙醇洗脱，收集3-8倍量洗脱液，通过强碱性苯乙烯型阴离子交换树脂吸附，以0.5mol/L的NaOH溶液洗脱，收集洗脱液，滤过，通过强酸性苯乙烯型阳离子交换树脂，收集流出液，滤过，浓缩，冷藏析出沉淀，分离沉淀，洗涤、干燥，粉碎即得。

所用饱和石灰水的质量为新鲜枸骨叶质量的10倍。

所用饱和石灰水的浸泡时间优选为36小时。

大孔吸附树脂洗脱用乙醇的浓度优选为40%，收集量优选为5倍量柱体积。

强碱性苯乙烯型阴离子交换树脂选自201×7、201×4、D201型强碱性苯乙烯型阴离子交换树脂中的一种。

强酸性苯乙烯型阳离子交换树脂选自001×7、001×4、D001型强酸性苯乙烯型阳离子交换树脂中的一种。

制备所得3,4-二咖啡酰鸡纳酸可采用下列方法检测。 

试验例1 HPLC法测定3,4-二咖啡酰鸡纳酸纯度

色谱条件

色谱柱：十八烷基硅烷键合胶硅胶为填充剂；流动相：甲醇-1%醋酸的水溶液(90∶10)；流速：1mL/min；检测波长：297nm；柱温：30℃。

 测定方法

精密称取3,4-二咖啡酰鸡纳酸2mg，置于50mL量瓶中，加人甲醇20mL，超声振荡使溶解，甲醇定容至刻度，吸取10μL，注入高效液相色谱仪，采用归一化法测定样品纯度。

采用本发明制备3,4-二咖啡酰鸡纳酸，利于大生产操作，能耗小，污染小。

下面将结合具体实施方式对本发明作进一步阐述，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。

具体实施方式

实施例1

取新鲜枸骨叶10Kg，加入80Kg的饱和石灰水浸泡24小时，压榨，滤过，浓缩，通过D101大孔吸附树脂吸附，水洗脱除杂，30%乙醇洗脱，收集3倍量柱体积洗脱液，通过201×7型强碱性苯乙烯型阴离子交换树脂吸附，以0.5mol/L的NaOH溶液洗脱，收集洗脱液，滤过，通过001×7型强酸性苯乙烯型阳离子交换树脂，收集流出液，滤过，浓缩，冷藏析出沉淀，分离沉淀，洗涤、干燥，粉碎即得3,4-二咖啡酰鸡纳酸6.5g，经HPLC检测，纯度为93.7%，UV、IR、MS、²HNMR、¹³CNMR等表征其物理性状的数据与现有技术相一致。

实施例2