[发明专利]具抗癌活性的熊果酸衍生物及其制备方法

说明书

技术领域

本发明具体涉及一种具抗癌活性的熊果酸衍生物及其制备方法。 

背景技术

目前，国内对熊果酸的研究报告多集中在熊果酸的提取分离工艺和药理学研究，特别是国内外对熊果酸的抗癌作用研究已见报道。如王涛等的“熊果酸抗肿瘤作用及其机制研究进展”（《药物生物技术》,2008,15[2]）；熊斌等的“熊果酸药理学的研究进展”（《国外医学药学分册》,2004,31[[3]）；夏国豪等的“熊果酸抗肿瘤作用研究进展”（《国外医学肿瘤学分册》，2002,29[6]）;等等。研究表明，熊果酸具有抗始发突变、抗促癌作用、抗氧化作用、细胞毒作用、诱导癌细胞分化、抗血管生成作用、诱导细胞凋亡。国内的白育军等报道了6种熊果酸母核修饰物（《华西药学杂志》，2003,18[2]）；杨定菊等报道了具有生物活性的聚乙二醇支载熊果酸（《中国药科大学大学学报》，2008,39[1]），并发表了专利《亲水性聚乙二醇支载熊果酸系列新药及其制备方法》；孟艳秋等开发了熊果酸修饰氨基酸、氨基醇、胺、杂环等系列衍生物等多项专利。然而，现有专利或文献中采用氨基酸修饰熊果酸时，均采用将熊果酸的C-28位羧基与天然α-氨基酸的α-氨基成酰胺键的方式，来制备氨基酸改性的熊果酸衍生物，尚未涉及将天然α-氨基酸与熊果酸以其他方式进行连结等有关方面的研究。 

发明内容

基于上述问题，本发明提供一种具抗癌活性的熊果酸衍生物及其制备方法，该衍生物是经经氨基酸化学改性的熊果酸衍生物，以乙二胺为连接臂、将α-氨基酸与熊果酸进行连结，研究表明该熊果酸衍生物具有良好抗癌活性。

本发明是通过如下技术方案实施的：

一种具抗癌活性的熊果酸衍生物，是经氨基酸化学改性制备的，其结构式为：

 (I)，

其中：R₁为羟基、乙酰氧基，R₂为羟基、氨基乙胺基、α-氨基酰氨基乙胺基，其中R₁和R₂基团不同时为羟基。

所述的氨基酸为天然α-氨基酸，这些氨基酸以成α-酰胺键的方式通过乙二胺与熊果酸的C-28位羧基连结；

具抗癌活性的熊果酸衍生物的制备方法为：

（1）熊果酸与乙酸酐反应生成化合物2；化合物2经过草酰氯活化后，与乙二胺反应生成化合物3；化合物3经过碱解、酸化，得到化合物4；

（2）化合物3与预先用Fmoc保护的天然α-氨基酸反应，再脱除Fmoc保护基，制备了化合物5 ；

（3）化合物4与预先用Fmoc保护的天然α-氨基酸反应，再经过脱Fmoc保护基后，制备了化合物6。

所述制备方法步骤（1）的具体过程为：

a: 5-15 g熊果酸用40-50 mL吡啶溶解，在冰浴条件下缓慢滴加20-30 mL乙酸酐，滴加完毕室温下反应6-9 h；停止反应，减压蒸除吡啶，残余物用二氯甲烷溶解，并依次用质量分数为5%盐酸、蒸馏水、饱和氯化钠溶液洗涤有机相，有机相再用无水硫酸钠除水1-3 h后过滤，滤液于40-50℃下减压浓缩后烘干至恒重，于50-70℃下烘干，得化合物2；

b: 取4-6 g化合物2完全溶于30-50 mL 二氯甲烷中，冰浴条件下缓慢滴加5-7 mL草酰氯，滴加完毕后继续维持冰浴搅拌0.5-2 h，后于室温下继续反应12-36 h；反应完毕，将上述溶液减压蒸馏，得白色泡沫状固体；在该固体中加入40~60 mL二氯甲烷至完全溶解并减压蒸干溶剂，所得产物用40-70 mL二氯甲烷溶解，成为备用溶液；

取10-30 mL无水乙二胺充分分散于40-60 mL二氯甲烷中，冰浴下缓慢滴加上述备用溶液；滴毕，继续冰浴20-40 min，后撤除冰浴，室温反应8-16 h；用质量分数为5%盐酸、蒸馏水、饱和氯化钠依次洗涤有机层，直至有机层呈中性，有机层再加入无水硫酸钠除水1-3 h后过滤，滤液减压蒸馏，得到白色固体，白色固体用甲醇重结晶，得到化合物3；

c: 取4-6 g化合物3溶于四氢呋喃与甲醇的混合溶液160-170 mL中，两者体积比例为(1-2):(1-2)；加入10-30 mL的3-5 mol/L氢氧化钠水溶液，室温下搅拌8-16 h，减压蒸除溶剂，加入200-300 ml二次蒸馏水，室温下充分搅拌0.5-2 h，减压抽滤，滤饼用二次蒸馏水洗涤至中性，减压蒸除溶剂，得到白色粉末状固体，白色固体用甲醇重结晶，得到化合物4。

所述制备方法步骤（2）的具体过程为：