[发明专利]多种微生物制备复合生物菌肥的方法

说明书

技术领域

本发明具体涉及一种多种微生物制备复合生物菌肥的方法，属于生物发酵工程技术领域，是采用多种功能性微生物和益生微生物制备复合微生物菌肥的方法。

背景技术

微生物菌肥是以微生物生命活动达到促进农作物生长，或产量增加或质量提高的一类制品。特定功能的微生物和这些活体微生物的重要作用是其共同特点。这些产品在降低化肥用量，提高化肥利用率和减少环境污染，已经取得较好效果，进一步研制开发具有广阔前景。就发明人所知，目前在提高产品质量，保证多功能菌种的数量，稳定应用效果和降低生产成本是目前迫切需要解决的问题。

发明内容

本发明的目的就是克服以上缺陷，提供一种能提高产品质量，保证多功能菌种的数量，稳定应用效果和降低生产成本的多种微生物制备复合生物菌肥的方法。

本发明的主要技术方案是这样实现的：所述的多种微生物制备复合生物菌肥的方法，包括功能菌种的制备，益生菌菌种的培养，和载体的选择和处理。其特征在于根据菌种的生理特点分别采取好氧培养和厌氧培养两种方式，获取最大数量的活菌细胞和代谢产物。选择经生物除臭和无害化处理的生活污泥作为载体。

所述的菌种包括芽孢杆菌属、链霉菌属、固氮菌属、根瘤菌属、酵母菌属、乳酸菌属、醋酸菌属7个属，共15个种的微生物。具有固氮、解磷、解钾、抗虫、抗病、刺激生长和多种活性酶及次生代谢产物，如多种有机酸、小分子肽、维生素、低聚糖类物质。能有效地改善作物营养，提高抗逆性，改善品质，增加产量。

所述的好氧培养方式，是采用发酵工业通用的液体深层培养罐，根据各菌种的需要选择适宜生长的培养基，通气条件培养，菌体达最大数量，成熟放罐。

所述的厌氧培养方式，是采用液体深层静置培养，根据各菌种的需要选择适宜培养基，主要是在厌氧条件下使其发酵，获得最大量的发酵产物。

所述菌种制备方法用的斜面培养基具有如下组份及较佳重量配比：蛋白胨8～12g牛肉膏4～6g葡萄糖1～3g琼脂12～20g蒸馏水1L。

所述的菌种液体培养用的培养基具有如下组份及较佳重量配比：

大豆水解物10～30g蛋白胨4～10g蔗糖16～24g KH₂PO₄3～8g MgSO₄1～6g水1L。

所述的菌种液体深层静置培养用的培养基，具有如下组份及较佳重量配比：

蔗糖10～30g蛋白胨4～10g酵母膏5-10g KH₂PO₄5～10gMgSO₄1～6g水1L。

所述经生物除臭和无害化处理的生活污泥作为载体，生活污泥各项指标符合国家排放标准。

其生产工艺是：

(1)菌种的好氧培养，包括如下步骤：

斜面菌种：试管斜面于25-32℃恒温培养，24-72h。

菌种悬液：试管斜面倒入无菌水，刮去菌苔，制备悬液。

液体培养基：菌种液体培养用的培养基具有如下组份及较佳重

量配比：大豆水解物10～30g蛋白胨4～10g蔗糖16～24gKH₂PO₄3～8g MgSO₄1～6g水1L。

灭菌：0.12-0.15Mpa，121-125℃，蒸汽灭菌30分钟。

接种：将菌种悬液接入灭菌的培养基中。

培养：25-32℃，罐压0.04-0.05，培养36-72h。

培养物复合①：将分别培养获得的培养液，混合，搅拌均匀。

(2)菌种液体深层静置培养：

斜面菌种：试管斜面于25-32℃恒温培养，24-72h。

菌种悬液：试管斜面倒入无菌水，刮去菌苔，制备悬液。

液体培养基：蔗糖10～30g蛋白胨4～10g酵母膏5-10gKH₂PO₄5～10g MgSO₄1～6g水1L

灭菌：115℃，蒸汽灭菌20分钟。

接种：将菌种悬液接入灭菌的培养基中。

培养：25-32℃，培养36-72h。

培养物复合②：将分别培养获得的培养液，混合，搅拌均匀。

(3)培养物复合①与培养物复合②复合：将两种复合物混合，搅拌均匀，即为液剂产品。

(4)载体吸附：