[发明专利]一种高稳定性液体α-半乳糖苷酶的制备工艺

说明书

技术领域

本发明涉及液体酶制剂领域，特别指高稳定性液体α-半乳糖苷酶的制备工艺。

背景技术

目前液体酶制剂尤其是液体α-半乳糖苷酶在饲料行业、食品行业已经得到了广泛的应用，但是，现有的液体α-半乳糖苷酶稳定性较差，具体来说就是当气温较高尤其是当气温在30℃以上时，其活性损失率较高，同时现有的液体α-半乳糖苷酶防腐效果差，容易受到细菌的污染，因而不便于保存和运输。

发明内容

本发明要解决的问题是：提供一种高稳定性液体α-半乳糖苷酶的制备工艺，通过该制备工艺制作出来的液体α-半乳糖苷酶无混浊、无沉淀、无异味，具有很高的稳定性，即在较高气温环境下，其活性不会明显降低，同时其抑菌效果和防腐性能强。

为了解决上述技术问题，本发明的高稳定性液体α-半乳糖苷酶的制备工艺，包括以下步骤：

第一步，将发酵放罐后的液体粗酶产品高速离心，其上清液经微滤除菌、超滤浓缩后得到高浓度液体α-半乳糖苷酶半成品，放入搅拌罐；

第二步，开动搅拌罐，缓慢加入磷酸或氢氧化钠，调节液体α-半乳糖苷酶的pH值至4.6-5.0；第三步，按照质量百分比加入0.15-0.40％的苯甲酸钠和0.35-0.55％山梨酸钾；

第四步，按照质量百分比缓慢加入10％的稳定剂到搅拌罐中，使之充分溶解至澄清透明，静置24h后灌装。

为了进一步提高液体α-半乳糖苷酶的稳定性，本发明的高稳定性液体α-半乳糖苷酶的制备工艺，稳定剂包括按照质量百分比配比的以下组份：

氯化钠30-50％；

山梨醇40-60％；

海藻糖10-30％。

本发明取得的有益效果是：(1)苯甲酸钠和山梨酸钾作为防腐剂加入到液体α-半乳糖苷酶中，具有抑制细菌生长的功能，防腐效果好；(2)放入磷酸或氢氧化钠，调整液体α-半乳糖苷酶的PH值，使PH值稳定在4.6-5.0之间，能进一步提高苯甲酸钠和山梨酸钾的防腐功效；(3)氯化钠、山梨醇和海藻糖作为稳定剂放入液体α-半乳糖苷酶中后，能有效的提高液体α-半乳糖苷酶在较高气温下的活性存留率，使得液体α-半乳糖苷酶在40℃温度下保存六个月后，依然能达到85％的活性。

具体实施方式

制备高稳定性液体α-半乳糖苷酶时，采用如下步骤：

第一步，将发酵放罐后的液体粗酶产品高速离心，其上清液经微滤除菌、超滤浓缩后得到高浓度液体α-半乳糖苷酶半成品，放入搅拌罐；

第二步，开动搅拌罐，缓慢加入磷酸或氢氧化钠，调节液体α-半乳糖苷酶的pH值至4.8；

第三步，按照质量百分比加入0.25％的苯甲酸钠和0.45％山梨酸钾；

第四步，按照质量百分比缓慢加入10％的稳定剂到搅拌罐中，使之充分溶解至澄清透明，静置24h后灌装。

本发明的高稳定性液体α-半乳糖苷酶的制备工艺，稳定剂包括按照质量百分比配比的以下组份：

氯化钠40％；

山梨醇45％；

海藻糖15％。

试验1

为了验证高稳定性液体α-半乳糖苷酶的活性，做如下试验：

分别取500ml样品于4℃、室温、40℃中保存1-12个月，表1为第1、3、6、12月检测到的活性存留率。

表1高稳定性液体α-半乳糖苷酶活性存留率

从表1可以看出，由本发明制备出的产品无论是在冷藏条件下(4℃)、室温条件下、还是高温条件下(40℃)其稳定性都良好，即使在高温条件下保存6个月活性存留率依然可以达到85％以上，且产品外观品质不发生变化，表明产品稳定性能较高，适用于常温保存及长途运输。

试验2

为了验证高稳定性液体α-半乳糖苷酶的抑菌能力，做如下试验：

分别取100ml样品于4℃、室温、40℃中保存0-12个月，表2是第0、1、3、6、12月检测到的杂菌含量，其中杂菌含量以CFU平板计数。

表2液体α-半乳糖苷酶菌量(个/mL)

从表2可以看出，本产品无论是在冷藏条件下(4℃)、室温条件下、还是高温条件下(40℃)其添加的防腐剂，主要是苯甲酸钠和山梨酸钾，其抑菌效果良好(食品级产品国标要求＜50000个/ml)，不会使产品在保存过程中产生胀气、霉变、发酵和异味，在冷藏条件下(4℃)保存效果更好。