[发明专利]一种培育转基因耐寒植物的方法有效
申请号: | 201110154784.X | 申请日: | 2011-06-10 |
公开(公告)号: | CN102226190A | 公开(公告)日: | 2011-10-26 |
发明(设计)人: | 李霞;董章辉 | 申请(专利权)人: | 中国科学院遗传与发育生物学研究所 |
主分类号: | C12N15/29 | 分类号: | C12N15/29;C12N15/82;A01H5/00 |
代理公司: | 石家庄汇科专利商标事务所 13115 | 代理人: | 王琪;周大伟 |
地址: | 050021 河北省*** | 国省代码: | 河北;13 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 培育 转基因 耐寒 植物 方法 | ||
1.一种培育转基因耐寒植物的方法,其特征在于:使序列表中SEQ ID NO:1所示蛋白质的编码基因在植物体内过表达,获得与正常植物相比具有高耐寒性的转基因植物。
2.根据权利要求1所述的培育转基因耐寒植物的方法,其特征在于:使序列表中SEQ ID NO:2所示的基因在植物体内过表达,获得与正常植物相比具有高耐寒性的转基因植物。
3.根据权利要求2所述的培育转基因耐寒植物的方法,其特征在于:首先构建含有SEQ ID NO:2所示基因的重组表达载体,然后利用此重组表达载体构建转化体,再利用此转化体侵染目的植物,筛选阳性植株,获得与正常植物相比具有高耐寒性的转基因植物。
4.根据权利要求3所述的培育转基因耐寒植物的方法,其特征在于:以SUPER1300为载体构建重组表达载体。
5.根据权利要求4所述的培育转基因耐寒植物的方法,其特征在于:将目的基因插入到SUPER1300的限制性内切酶Xba I和Kpn I酶切识别位点之间,得到重组表达载体,命名为SUPER1300-35S-GmICO。
6.根据权利要求3所述的培育转基因耐寒植物的方法,其特征在于:以pEZR(K)LC为载体构建重组表达载体。
7.根据权利要求6所述的培育转基因耐寒植物的方法,其特征在于:将目的基因插入到pEZR(K)LC的限制性内切酶Kpn I和BamH I酶切识别位点之间,得到重组表达载体,命名为pEZR(K)LC-35S-GFP-GmICO。
8.根据权利要求3所述的培育转基因耐寒植物的方法,其特征在于:利用重组表达载体转化农杆菌GV3101获得转化体,然后再利用农杆菌介导的蘸花法转化目的植物,筛选阳性植株,经过三代筛选得到纯合的与正常植物相比具有高耐寒性的转基因植物。
9.根据权利要求1~8任一项所述的培育转基因耐寒植物的方法,其特征在于:所述目的植物为大豆。
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