[发明专利]基于小核酸药物成骨治疗的骨靶向递送系统及其制备方法

权利要求书

1.一种基于小核酸药物成骨治疗的骨靶向递送系统，包括脂质体、骨靶向分子和小核酸药物，其特征在于，骨靶向分子选自双磷酸盐、SEQ ID NO：1、SEQ ID NO：2和针对成骨样细胞筛选出的适配子中的一种或几种，小核酸药物选自具有促进骨形成功能的小干扰核糖核酸、微小核糖核酸的模拟物和微小核糖核酸的阻断剂中的一种或几种。

2.如权利要求1所述的骨靶向递送系统，其特征在于，所述脂质体中阳离子脂质占总脂质含量的0％～50％，非阳离子脂质占总脂质含量的50％～100％。

3.如权利要求2所述的骨靶向递送系统，其特征在于，所述阳离子脂质选自1，2-二油烯氧基-3-三甲氨基丙烷、N-[1-(2，3-二油基氧)丙基]-N，N，N，-氯化三甲铵和DC-胆固醇中的一种或几种。

4.如权利要求2所述的骨靶向递送系统，其特征在于，所述非阳离子脂质选自二油酰二甲基铵丙烷、二油酰磷脂酰乙醇胺、二硬脂酰磷脂酰胆碱、二棕榈酰磷脂酰胆碱、二油酰磷脂酰胆碱和DLin-KC2-DMA中的一种或几种。

5.如权利要求1所述的骨靶向递送系统，其特征在于，所述骨靶向递送系统含有二硬脂酰磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇2000-马来酰亚胺以及所述骨靶向分子末端进行巯基修饰。

6.如权利要求1所述的骨靶向递送系统，其特征在于，所述骨靶向分子以胶束的形式插入所述脂质体双分子层。

7.如权利要求1所述的骨靶向递送系统，其特征在于，所述骨靶向分子占所述脂质体脂质浓度的2～10mol％。

8.如权利要求1所述的骨靶向递送系统，其特征在于，所述小核酸药物与所述脂质体脂质质量比为2％～20％。

9.如权利要求1所述的骨靶向递送系统，其特征在于，所述小干扰核糖核酸为针对成骨的负调控基因的小干扰核糖核酸。

10.如权利要求9所述的骨靶向递送系统，其特征在于，所述针对成骨的负调控基因的小干扰核糖核酸为针对CKIP-1、WIF-1或Hoxc8的小干扰核糖核酸。

11.如权利要求10所述的骨靶向递送系统，其特征在于，所述针对CKIP-1的小干扰核糖核酸包含SEQ ID NO：3。

12.一种基于小核酸药物成骨治疗的骨靶向递送系统的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)制备含有小核酸药物的脂质体：取脂质溶解在乙醇中，在搅拌状态下缓慢加至含有小核酸药物的缓冲液溶液中，采用挤出仪对脂质体进行挤出，透析去除乙醇，小核酸药物选自具有促进骨形成功能的小干扰核糖核酸、微小核糖核酸的模拟物和微小核糖核酸的阻断剂中的一种或几种；

(2)连接骨靶向分子和含有小核酸药物的脂质体：将骨靶向分子与含有小核酸药物的脂质体混合连接，制得骨靶向小核酸药物脂质体，骨靶向分子选自双磷酸盐、SEQ ID NO：1、SEQ ID NO：2和针对成骨样细胞筛选出的适配子中的一种或几种；

(3)纯化骨靶向小核酸药物脂质体。

13.如权利要求12所述的骨靶向递送系统的制备方法，其特征在于，步骤(1)中所述脂质体中阳离子脂质占总脂质含量的0％～50％，非阳离子脂质占总脂质含量的50％～100％。

14.如权利要求12所述的骨靶向递送系统的制备方法，其特征在于，步骤(1)中所述乙醇在总体积中所占比例为30％～40％。

15.如权利要求12所述的骨靶向递送系统的制备方法，其特征在于，步骤(1)中所述缓冲液溶液为枸橼酸盐缓冲液溶液，10～50mM，pH值为3.5～5.5。

16.如权利要求12所述的骨靶向递送系统的制备方法，其特征在于，步骤(1)中所述小核酸药物与所述脂质体脂质质量比为2％～20％。

17.如权利要求12所述的骨靶向递送系统的制备方法，其特征在于，步骤(1)中所述小干扰核糖核酸为针对成骨的负调控基因的小干扰核糖核酸。

18.如权利要求12所述的骨靶向递送系统的制备方法，其特征在于，步骤(2)中所述骨靶向分子末端进行巯基修饰。