[发明专利]裂褶菌多糖在防治烟草花叶病毒病上的应用

说明书

技术领域

本发明属于植物病害防治领域，具体地说涉及裂褶菌多糖提取物在防治烟草花叶病毒病上的用途。

背景技术

烟草花叶病毒(Tobacco mosaic virus，TMV)能侵染茄科、葫芦科、十字花科等300多种植物，是危害严重的病毒之一。防治烟草花叶病毒病的主要方法是培育抗病品种和化学药剂，育种手段由于抗病基因来源少而受到限制，化学药剂对烟草花叶病毒病的防治不仅效果不理想，而且会造成环境污染，因而其应用也受到限制。因此，环境损害小且抗病毒活性高的植物源农药成为研究的热点。

裂褶菌(Schizophyllum commune Fr.)又称白参、树花，属于真菌门，担子菌亚门、层菌纲、非褶菌目、裂褶菌科、裂褶菌属。具有较高营养和药用价值。裂褶菌广布于世界各地，我国大部分地区都有分布。裂褶菌多糖具有抗癌、抗菌等多种生理活性，如专利申请《具有抗癌效果的蘑菇多糖体组合物及其制备方法》(公开号：CN101766644A)公开了包括裂褶菌多糖在内几种蘑菇多糖组合物具有提高免疫活性和促进细胞因子的作用；《免疫刺激剂》(公开号：CN1798563A)公开了裂褶菌多糖在内的多糖复合体作为免疫刺激剂的用途。

经检索，裂褶菌多糖主要应用于人的医学领域，在抗植物病毒方面的应用尚未见报道。

发明内容

本发明目的在于提供一种用于裂褶菌多糖提取物。

本发明另一目的在于提供上述裂褶菌多糖提取物的制备方法。

本发明第三目的在于提供上述裂褶菌多糖提取物在防治烟草花叶病毒病上的用途。

为实现上述目的，本发明的技术方案如下：

一种裂褶菌多糖提取物，按照如下方法制备：

(1)按照裂褶菌菌丝粉和水之间1g∶10-20mL的比例将裂褶菌菌丝粉加入到90℃以上的热水中，然后在100℃水浴中浸提8～10小时，再用二层纱布过滤，得到滤液和滤渣；

(2)按照滤渣和水之间1g∶10-20mL的比例将步骤(1)所得滤渣加入到90℃以上的热水中，然后在100℃水浴中浸提8～10小时，再用二层纱布过滤，收集滤液；

(3)合并步骤(1)和步骤(2)所得滤液，真空浓缩至原体积的1/20～1/50，再与5倍体积的95％乙醇混合均匀，于4℃下静置过夜，5000rpm下离心10min，倒掉上清液，沉淀为白色纤维状；将所得沉淀用75％乙醇洗涤2次，60℃烘干至恒重，即得裂褶菌多糖提取物。

上述裂褶菌多糖提取物的制备方法，按照如下步骤进行：

(1)按照裂褶菌菌丝粉和水之间1g∶10-20mL的比例将裂褶菌菌丝粉加入到90℃以上的热水中，然后在100℃水浴中浸提8～10小时，再用二层纱布过滤，得到滤液和滤渣；

(2)按照滤渣和水之间1g∶10-20mL的比例将步骤(1)所得滤渣加入到90℃以上的热水中，然后在100℃水浴中浸提8～10小时，再用二层纱布过滤，收集滤液；

(3)合并步骤(1)和步骤(2)所得滤液，真空浓缩至原体积的1/20～1/50，再与5倍体积的95％乙醇混合均匀，于4℃下静置过夜，5000rpm下离心10min，倒掉上清液，沉淀为白色纤维状；将所得沉淀用75％乙醇洗涤2次，60℃烘干至恒重，即得裂褶菌多糖提取物。

裂褶菌菌丝粉可通过将裂褶菌烘干、粉碎、过60目筛而得，裂褶菌可于市场上购买。

上述裂褶菌多糖提取物在防治烟草花叶病毒病上的应用。

本发明裂褶菌多糖提取物的使用方法，将裂褶菌多糖提取物用水稀释成浓度为0.2mg/mL的溶液，喷施于3～5叶期的烟草或辣椒等植物的叶片上。

本发明具有的优点：(1)本发明裂褶菌多糖提取物对烟草花叶病毒防治效果好，在喷施烟草72小时后，接种烟草花叶病毒，对烟草花叶病毒的抑制率可达到70％以上，为烟草花叶病毒病的防治提供了一种新的途径；(2)本发明裂褶菌多糖提取物属于天然提取物，对人类和环境无害，属于环境友好的生物农药；(3)本发明裂褶菌多糖提取物制备方法简单，成本低。

具体实施方式

实施例1裂褶菌的培养和菌丝粉的制备

按照如下方法进行：

(1)母种活化：将裂褶菌母种转接在PDA固体培养基(PDA固体培养基的组成成分及其重量百分比为：马铃薯淀粉20％、葡萄糖20％、琼脂20％、其余为水)上活化，在28℃培养10天；