[发明专利]一种用于检测原料乳及乳制品中β-内酰胺酶的试剂盒及其检测方法

权利要求书

1.一种用于检测原料乳及乳制品中β-内酰胺酶的试剂盒，其特征在于：包括β-内酰胺酶标准品、青霉素钾标准液品、蛋白质沉淀剂三氯乙酸（TCA）、显色剂2,2'-联喹啉乙醇溶液和络合剂CuSO₄；其中所述试剂β-内酰胺酶标准品酶活度为2000U/L, 青霉素钾标准液品活度为50000U/mL，蛋白质沉淀剂TCA 浓度为10%~15%，2,2'-联喹啉乙醇溶液浓度为0.05%~0.1%，络合剂CuSO₄浓度为20~40mmol/L。

2.根据权利要求1所述的一种用于检测原料乳及乳制品中β-内酰胺酶的试剂盒，其特征在于：所述青霉素噻唑酸标准反应液是按照如下方法制备得到的，青霉素钾底物浓度为50000U/mL，加入2000U/mL β-内酰胺酶标准品，37℃水浴60min；高速冷冻离心（10000rpm）10min，上清液即为青霉素噻唑酸标准反应液。

3.  根据权利要求1所述的一种用于检测原料乳及乳制品中β-内酰胺酶的试剂盒，其特征在于，其用于检测乳制品中β-内酰胺酶的检测方法，具体步骤如下：

(1)依照反应原理和仪器性能设定检验参数；

(2) 在空白管里加入蒸馏水，在标准管里加入标准液，在样品管里加入原料乳或乳制品；

(3)将步骤(2)中的空白管、标准管和样品管同时加入蛋白质沉淀剂10%~15%TCA，充分振荡5min，4000rpm离心10min，离心后取上清液100~200μL，加入2.5~3.5mL 2,2'-联喹啉乙醇，0.2~0.4mL 20~40mmol/mL CuSO₄溶液，充分摇匀，室温静置5 min进行显色反应后，利用可见分光光度计测定吸光度值，计算实验结果。

4.根据权利要求3所述的β-内酰胺酶的试剂盒及其检测方法，其特征在于：所述的检吸光度法采用单波长检测，在547nm单波长条件下测定吸光度。