[发明专利]一种红薯茎叶多糖的提取方法

权利要求书

1.一种红薯茎叶多糖的提取方法，其特征在于：以红薯茎叶为原料，采用热水浸提法提取粗多糖，然后经除蛋白、脱色，沉淀分离，再经纯化，干燥，粉碎，得多糖纯品，具体步骤如下：

 a、备料：以新鲜的红薯茎叶为原料，洗净、晾干、粉碎、过20目筛，待用；

b、浸提：将经过粉碎的红薯茎叶料投入浸提器中，加入蒸馏水或去离子水，搅拌混匀，加热到一定温度下，开始回流提取一段时间后，过滤分离，得第一次浸提滤液，滤渣再加入适当的蒸馏水，采用第一次提取的同样方法进行浸提，得第二次浸提滤液，合并两次浸提滤液，浸提时料液比为1：（18-22），浸提温度为95-100℃，回流提取1-2.5h；

c 、浓缩：将浸提滤液投入真空浓缩器中，减压、低温浓缩至浸提滤液原体积1/6左右，得红薯茎叶粗多糖浓缩液，待用；

d、脱色：把红薯茎叶粗多糖浓缩液投入脱色釜中，在搅拌的条件下加入少量的浓度为20%～30%的双氧水，混合均匀，于温度为45-55℃条件下保温脱色1.5-2.5h,得脱色液；

e、醇析：把脱色液投入醇析釜中，在搅拌的条件下，慢慢加入适量的浓度为90-95%的乙醇，直至料液中乙醇体积浓度达到75%～85%为止，静置，让醇析完全后，再进行离心分离，得下层沉析物为红薯茎叶粗多糖；

f、溶解：把红薯茎叶粗多糖用适量的蒸馏水溶解，置于高速离心机中，离心分离，收集上层清液，弃去下层不溶物；

g、除杂：在所得到的红薯茎叶粗多糖清液中，加入Sevag试剂震荡0.5h左右，静置，再离心分离，弃去下层杂质，收集上层液体，将收集的上层液体静置待分层后，将水相与有机相分开,有机相回收氯仿和正丁醇循环使用，水相为红薯茎叶粗多糖澄清液，待用, 红薯茎叶粗多糖清液与Sevag试剂的体积比为： 1：（1-1.5）；

h、层析：将红薯茎叶粗多糖澄清液上层析柱，用氯化钠水溶液洗脱，收集含多糖的洗脱液，得红薯茎叶多糖纯品洗脱液，待用； 

i、醇析：把含红薯茎叶多糖的层析液投入沉析釜中，在常温、搅拌的条件下，慢慢加入适量的浓度为90-95%的乙醇，直至料液中乙醇体积浓度达到75%～85%为止，静置，让红薯茎叶多糖沉淀析出，再进行离心分离，下层沉淀物为红薯茎叶粗多糖，液相通过减压蒸发回收乙醇；

j、干燥：把红薯茎叶多糖沉析物洗涤后再进行低温干燥处理，然后粉碎过80-85目筛，得到红薯茎叶多糖纯品。

2.根据权利要求1所述的红薯茎叶多糖的提取方法，其特征在于：粗糖纯化时所用的Sevag试剂为氯仿与正丁醇的混合液二者的体积比为氯仿：正丁醇=（4.5-5.5）：1 。

3.根据权利要求1所述的红薯茎叶多糖的提取方法，其特征在于：步骤（h）中用于纯化的层析柱填料为葡萄糖凝胶SephadexG-200，装柱前应先泡在0.1mol/L的氯化钠水溶液中，装柱后用相同的浓度的氯化钠水溶液平衡12-13h之后使用。