[发明专利]一种螺旋藻活性多糖及其制备方法

说明书

技术领域

本发明属于天然产物制备领域，更具体涉及一种螺旋藻活性多糖及其制备方法。 

背景技术

多糖是生物体内重要的生物大分子，是动植物中的支持组织和重要的能量来源。近年来，有关多糖及糖复合物的大量研究表明，多糖有特殊的生物活性，能提高机体的免疫功能，一切重要的生命活动过程都有糖的参与。人们对多糖的研究早期多集中于药用植物类多糖的生物活性方面，如对黄芪、灵芝多糖的活性研究。随着海洋药物的兴起，对海藻多糖的活性研究已成为目前药物研究的重点。关于螺旋藻多糖的药理研究和制备工艺研究已有大量的文献报道，但针对药理活性与提取、分离方法间联系的相关研究还未见报道，不完善的药理和工艺研究导致现有工艺加工所得螺旋藻多糖的生物活性大大降低。 

发明内容

为了解决上述问题，本发明将生物活性的检测贯穿于螺旋藻多糖的整个提取、分离过程，在综合考虑多糖得率和生物活性的基础上，最大程度的保留了制备的螺旋藻多糖的生物学活性，大大减少工艺的盲目性和在提取纯化过程中造成的活性成分的破坏与丢失，使制备的多糖具有良好的开发应用前景。

本发明是通过如下技术方案实施的：

一种螺旋藻活性多糖的制备方法包括螺旋藻鲜料冻融破壁处理、螺旋藻粗多糖微波提取、螺旋藻粗多糖脱蛋白处理、螺旋藻活性多糖冷冻干燥四步骤，在多糖提取、脱蛋白结束后，分别检测各试验多糖样的生物活性，以提取物得率、生物活性检测值综合评分得分高的工艺条件，作为螺旋藻活性多糖的优化微波提取条件；以多糖保存率、生物活性检测值、蛋白脱除率综合评分得分高的工艺条件，作为螺旋藻活性粗多糖的优化脱蛋白条件；

所述提取物得率，生物活性检测值综合评分得分高，是指评分时以各指标测定值的最大值为参照将数据进行归一化，再给出不同的权重，提取物得率权重系数设为0.4，脂质过氧化抑制率权重系数设为0.6，加权求和计算得分，得最高分；

所述多糖保存率、生物活性检测值、蛋白脱除率综合评分得分高，是指评分时以各指标测定值的最大值为参照将数据进行归一化，再给出不同的权重，多糖保存率的权重系数设为0.3，脂质过氧化抑制率的权重系数设为0.3、蛋白脱除率的权重系数设为0.4，加权求和计算得分，得最高分。

所述检测多糖生物活性的方法包括以抗脂质过氧化活性作为产品标示的主要活性指标，以TBA法测定抗小鼠肝组织脂质过氧化活性作为活性试验方法。

所述优化微波提取条件为：微波功率：200-600W，提取时间 3-7min。

所述优化脱蛋白条件是将微波提取后的提取液用铵盐沉淀蛋白，沉淀后的提取液减压浓缩，用一次Sevag法处理进行脱蛋白。

所述铵盐的质量浓度为5-15%，铵盐沉淀蛋白的时间为10-20min。

所述的螺旋藻活性多糖其主要活性成分是分子量分别为100000和9500的结合蛋白多糖。

本发明的优点为：

1）本发明制备的螺旋藻活性多糖具很好的抗脂质过氧化活性，有明确的产品标示主要活性。工艺评价过程选择可靠的活性试验方法，并充分考虑了选择方法与抗肿瘤、提高免疫力活性的联系，重视生物活性试验供试材料制备条件与活性试验结果联系的探讨，避免加工过程活性成分的破坏与丢失，保证原料活性成分完整（活性的保持与高得率获得活性多糖），高效益的生产螺旋藻活性多糖；

2）在制备工艺中，通过加入铵盐初步沉淀的蛋白可复性利用，有利于资源的高效利用；

3）本发明制备的螺旋藻活性多糖、可作为原料药或食品添加剂提供给制药与食品加工企业，生产不同药物或功能性食品；

4）本发明提出的螺旋藻活性多糖加工工艺优化方法和主要工作思路，不仅适用于本发明，而且同样适用于其他涉及螺旋藻活性多糖加工工艺的探讨，不同形式的螺旋藻活性多糖产品，如抗肿瘤、抗病毒、抗衰老、抗突变、提高免疫力等螺旋藻活性多糖产品，通过调整活性试验的方法，即可方便的完成相关工艺的优化、制备工作。

附图说明

图1为微波提取正交试验因素水平表；

图2为L₉(3⁴)正交试验设计表及结果；

图3为综合评分方差分析表，注：F_0.05(2.2)＝19.0；

图4为不同脱蛋白处理工艺对螺旋藻活性提取物多糖保存率、蛋白脱除率及活性的影响。

具体实施方式

以下通过实施例进一步说明本发明，但本发明并不局限于此实施例。