[发明专利]复合生物活性肽的制备方法

权利要求书

1.一种复合生物活性肽的制备方法，包括大豆蛋白提取工序、蚯蚓酶液提取工序，还包括按下述步骤进行的复合生物活性肽制备工序：

a．取大豆分离蛋白加入适量蒸馏水配成0.5～25%的大豆蛋白溶液；

b．取配置好的大豆蛋白溶液1～500ml于酶反应器中，然后在40～100℃下热处理10min, 冷却至30～75℃后用1mol·l^-1NaOH溶液调节pH值至4.0～11.0;

c．加入蚯蚓酶液10～500ml，再加入蒸馏水10～800ml，确保反应液总体积为50～1000ml，慢慢搅拌，进行水解,反应过程中及时加入1mol·l^-1NaOH溶液使系统pH值稳定在2.0～10.0，酶解温度保持在30～90℃；

d．水解反应0.5～12h后,将酶解液迅速加热至90℃,保持10 min灭酶,冷却,再以3000～20000 r·min^-1离心5～15min，取上清液，冷冻干燥或喷雾干燥,得到含有大豆肽和蚯蚓肽的复合生物活性肽粉末，其水解度为38%，肽得率为62%。

2.根据权利要求1所述的复合生物活性肽的制备方法，其特征在于，所述大豆蛋白提取工序按如下方法进行：

将豆粕粉碎后置于容器中，按固液比1：1～1：12加入蒸馏水，30～70℃恒温水浴，边搅拌边加入1mol·l^-1NaOH溶液调节pH值至 3～10 之间，继续充分搅拌5～120min，静置30min；500～10000 r·min^-1离心5～60 min，收集上清液, 向上清液中逐滴加入1mol·l^-1盐酸溶液,边加盐酸边搅拌，调 pH 值至 2～10时, 30～80℃恒温水浴，静置 10～60 min，再以500～10000 r·min^-1离心5～30 min, 收集沉淀, 喷雾干燥或者冷冻干燥备用，用微量凯氏定氮法测定分离蛋白粉末的蛋白质含量。

3.根据权利要求1所述的复合生物活性肽的制备方法，其特征在于，所述蚯蚓酶液提取工序按如下方法进行：

将新鲜蚯蚓洗净,让其尽量吐出体内的食物残渣，称取10～500g鲜蚯蚓，加入20～1000ml柠檬酸-磷酸氢二钠缓冲液，匀浆后，4℃充分静置，4℃条件下500～20000r·min^-1离心1～30 min，取上清液即为蚯蚓酶液，4℃冷藏备用。

4.根据权利要求1或3所述的复合生物活性肽的制备方法，其特征在于，所述蚯蚓酶液提取工序中，用干燥蚯蚓粉10～500g，加入10～1000ml柠檬酸-磷酸氢二钠缓冲液来代替新鲜蚯蚓。