[发明专利]人工合成的美洲商陆抗病毒蛋白（PAP）抗原、抗体及其制备方法、应用

说明书

技术领域

本发明专利属于生物学和生物技术领域，特别是涉及利用人工合成的多肽作为抗原，制备得到美洲商陆抗病毒蛋白多克隆抗体的技术。 

背景技术

美洲商陆抗病毒蛋白(Pokeweed antiviral protein，PAP)是从美洲商陆(Phytolaccaamericana L.)植株春天叶片中分离出的单链(I型)核糖体失活蛋白(Ribosome InactivatingProteins，RIPs)，分子量约为30kD。RIPs具有独特的rRNA-N糖苷酶活性，能够水解真核生物核糖体28S大亚基RNA GAGA茎环(stemloop)结构上特定位点的腺嘌呤残基，从而使核糖体失活，干扰核糖体与延伸因子的结合，继而抑制蛋白质的生物合成(Irvin，J.D.&Uckun，F.M.Pokeweed antiviral protein：ribosome inactivation and therapeutic applications.Pharmacol.Ther.1992，55：279-302)。 

自Duggar等1925年发现商陆中存在着一种潜在的能阻碍植物病毒传播的因子，Kassanis等从美洲商陆叶片中分离、纯化了该阻碍因子，并初步描述了其特性后，人们开始了一系列研究。研究发现PAP是目前所有RIPs中最为有效的抗病毒蛋白，低浓度就具有很强的抗性。其不仅对7个病毒组的7种植物病毒有抑制作用，还对包括艾滋病毒(human immunodeficiencyvirus 1，HIV 1)在内的多种动物病毒、真菌、细菌的侵染有一定的抑制作用，在体外，该蛋白可以阻碍脊髓灰质炎病毒和流感病毒的复制，在体外无细胞蛋白质合成系统(兔网织红细胞)中，可以阻碍真核生物蛋白质的合成(Kassanis，B.，&A.Kleczkowski.The isolationand some properties of a virus-inhibiting protein from Phytolacca esculents.J.Gen.Microbiol.Academic Press，N.Y.1948；Tomlinson.J.A.et al.，The inhibition ofinfection by cucumber mosaic virus and influenza virus by extract of Phytolaccaamericana，J.Gen.Virol 1974，22，225-232；Aron G M，Irvin J D，Antimicrob.AgentsChemother.1980，17：1032-1033；Zarling J M，Moran P A，Haffar O et al.Inhibitionof HIV replication by pokeweed antiviral protein targeted to CD4 cells by monoclonalantibodies.Nature，1990，347：92-95；Chen Z C，White R F，Antoniw J F，et al.Effectof pokeweed antiviral protein(PAP)on the infection of plant viruses.Plant Pathology，1991，40：610-612；Oalson，M.S.Ramakrishnan，T.Anand，Ribosomal inhibitory proteins from plants inhibits HIV-1replication in acutely infected peripheral bloodmononuclear cells，AIDS Res.Hum.Retrovir.1991，7，1025-1030)。 

正是由于PAP有着这种广谱性的抑制危害动、植物及人体的病原真菌、细菌和病毒的作用，因此其越来越引起人们的好奇和重视，不断的促使人们对其进行深入研究，并希望在不久的将来在农业和医学领域发挥其特殊的作用和实用价值。