[发明专利]飞秒激光诱变吸水链霉菌子囊亚种选育子囊霉素高产菌株方法及培养基制备无效
申请号: | 201110165684.7 | 申请日: | 2011-06-20 |
公开(公告)号: | CN102250872A | 公开(公告)日: | 2011-11-23 |
发明(设计)人: | 闻建平;齐海山 | 申请(专利权)人: | 天津大学 |
主分类号: | C12N13/00 | 分类号: | C12N13/00;C12N15/01 |
代理公司: | 天津市北洋有限责任专利代理事务所 12201 | 代理人: | 王丽 |
地址: | 300072 天*** | 国省代码: | 天津;12 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 激光 诱变 吸水 霉菌 子囊 选育 霉素 高产 菌株 方法 培养基 制备 | ||
1.一种飞秒激光诱变吸水链霉菌子囊亚种选育子囊霉素高产菌株方法,其特征在于包括以下过程:将吸水链霉菌子囊亚种在室温下,取成熟孢子斜面加入适量无菌水,制成106-107个/ml的单孢子悬浮液,将0.2ml的悬浮液分装于无菌的1.5ml的离心管内,采用中心波长800nm、脉宽150fs、频率76MHz的钛宝石飞秒激光在照射功率10-30mW下,对该孢子辐照1-10min,然后把经辐照处理的孢子悬液梯度稀释103-104倍,取稀释后的孢子液0.1ml涂布于固体平板培养基中28℃培养10d,选取生长良好的单菌株接种于斜面培养基28℃培养10d,接适量孢子悬浮液于装有40ml种子培养基的250ml摇瓶中,28℃、200rpm摇床中培养48h,后接种于装有40ml发酵培养基的250ml摇瓶中,26℃-30℃、180-220rpm摇床中培养144-192h,从中获得诱变的遗传稳定、发酵单位提高的吸水链霉菌子囊亚种的突变株。
2.权利要求1的方法中的培养基制备,其特征在于固体和斜面培养基组成及含量为:大豆粉15-25g/L、甘露醇15-25g/L、琼脂18-22g/L,初始pH7.0。
3.权利要求1的方法中的培养基制备,其特征在于液体发酵培养基组成及含量为:淀粉15-25g/L、糊精35-45g/L、麸质粉2-3g/L、蛋白胨4-6g/L、酵母粉8-12g/L、玉米浆4-6g/L、冷榨豆饼粉4-6g/L、磷酸氢二钾0.5-1.5g/L、硫酸铵0.5-1.5g/L、硫酸镁0.5-1.5g/L、碳酸钙0.5-1.5g/L,初始pH7.0。
4.权利要求1的方法中的培养基制备,其特征在于液体种子液培养基组成及含量为:淀粉8-12g/L、葡萄糖25-35g/L、蛋白胨5-7g/L、酵母粉5-7g/L、碳酸钙1-3g/L,初始pH7.0。
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