[发明专利]一种提高毕赤酵母对水果采后病害生物防治效力的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种利用海藻糖(trehalose)诱导培养提高毕赤酵母菌种（Pichia caribbica）对水果采后病害防治效力的方法，属于水果采后生物防治领域。

背景技术

水果在采摘、运销、储藏过程中因腐烂造成的损失是巨大的，也是全球关注的问题。据报道，在发达国家有10%－30%的新鲜产品由于采后病害导致腐烂，而在缺乏贮运冷藏设备的发展中国家，果实采后腐烂率则高达40%－50%。国外水果贮藏保鲜量占水果总产量60%以上，目前我国果品贮藏量800多万吨，不到总量的15%，其中冷藏库和气调库的贮藏量为70万吨，仅占总产量的7%。我国水果采后损失一般在20%－30%，高者甚至达到50%。2007年3月国家统计局发布的《中华人民共和国2006年国民经济和社会发展统计公报》显示，2006年我国水果总产量达17050万吨。据此估算，我国水果采后的损失每年将达到数百亿元人民币的水平。

水果腐烂的主要原因在于病原微生物的致病作用，这些病原微生物主要有灰葡萄孢（Botrytis cinerea）、葡枝根霉（Rhizopus stoloniger）、青霉（Penicillium spp.）、毛霉（Mucor spp.）、链格孢（Alternaria spp.）、曲霉（Aspergillus spp.）和软腐细菌（Erwinia sp.）等。病原微生物对采后水果的危害不仅在于其导致水果在数量上造成的严重损失，而且由于许多病原真菌能分泌产生许多次生代谢产物从而引起严重的食品安全问题，如扩展青霉（P. expansum）产生的棒曲霉素（patulin）、灰葡萄孢（B. cinerea）产生的葡双醛霉素（botrydial）等。

目前最常用的控制水果采后腐烂的方法是低温贮藏和化学杀菌剂处理。近年来低温贮藏技术在我国得到了广泛的发展和应用，但已有的冷藏设备往往不能满足大多数水果的需要。同时，在低温条件下仍有相当数量的致病菌能够在水果上生长，并造成水果腐烂。例如，能引起多种水果灰霉病的灰葡萄孢 (Botryris cinerea)，也称灰霉菌，在-0.5℃时也能生长繁殖，引起许多水果腐烂变质，造成严重经济损失。而那些对低温敏感的水果，因只能在不低于使产品受冷害的温度下贮藏，病原物的生长、繁殖更不能得到有效地抑制，腐烂相当严重。长期以来，控制水果采后病害的主要措施是使用杀菌剂。化学杀菌剂对防治病害可以起到立竿见影的效果，但是，化学杀菌剂长期和大量的使用，不仅导致病原微生物产生抗药性, 同时严重污染环境，有损于人类健康。美国国家科学院（National Academy of Scinces）的一份报告显示，在用于处理食品的全部农药中，杀菌剂构成60％的致癌危险。

随着国家经济发展和消费水平的提高，人们对食品安全和环境保护意识的日益增强，目前多种化学杀菌剂（如Captan、Benomyl等）已被明令禁止使用或者在部分水果产品上限制使用，其直接的后果是目前许多水果采后病害已经没有杀菌剂能予以控制。因此，各国科学家都在积极地探索能代替化学杀菌剂的安全、高效的新型水果采后病害防治方法。当前国际上对用拮抗微生物进行水果采后病害的生物防治的研究已经取得了阶段性的成果，并认为这是最有希望取代化学杀菌剂的方法之一。

随着酵母分类、生态、生理、生物化学和分子生物学的研究取得进展，人们对果蔬贮藏中利用酵母的兴趣日益提高。国内外的研究表明，许多酵母菌应用于水果表面，可以防治水果由致病霉菌引起的病害，这些酵母被称为拮抗酵母。酵母菌遗传稳定，抑菌谱广、效价高，一般不产生对人和寄主植物有害的代谢产物，安全性高，且对营养要求低，生长快，并对多种胁迫、逆境具有较强的耐受力，对大多数杀菌剂不敏感，对其它化学和物理处理能够相容。因此近年来拮抗酵母作为水果采后病害生防菌，受到国际上的广泛关注。国外方面, Sansone等从苹果表面分离得到的粘红酵母对由Botrytis cinerea引起的灰霉病有显著的防治效果, 在实验室条件下, 其腐烂率与对照相比降低了 54%。Calvente 等的研究也发现粘红酵母对水果采后青霉病害有显著的抑制效果。