[发明专利]一株具有防霉作用的短小芽孢杆菌

说明书

技术领域

本发明提供一株对仓储片烟具有防霉作用的短小芽孢杆菌菌株，及其应用，属于生物防治领域。

背景技术

烟叶的自然醇化或人工发酵是提高烟叶燃吸品质和可用性的必要环节之一。片烟醇化贮藏周期长达1-2年，期间极易发生因微生物引起的霉变，使烟叶品质降低或完全失去使用价值。腐败是经细菌生长、繁殖后引起的变软、发臭性劣化。霉变是指由霉菌引起的劣化，在烟叶仓储损耗中占着很大的比例，严重影响烟叶的外观品质和香味品质，降低烟叶的使用价值，是当前储烟重要安全问题之一。2002年我国加入WTO后，储烟逐渐由片烟替代把烟，储烟霉变问题更加突出，据统计，贮烟和卷烟制品每年因霉变造成损失相当惊人，达到烟草商品总额的1％-3％。尤其是当前储烟醇化从自然醇化向人工可控醇化(增温增湿)发展趋势明显，霉变成为亟待解决的首要仓储难题。此外，霉菌能产生霉菌毒素，会严重的影响人体健康，特别是很多霉菌如黄曲霉具有致癌作用。因此，控制储烟霉变损失，除经济上需要外，也是控制微生物污染、保护环境和人类健康的需要。

片烟的防霉非常困难，这主要是由于片烟属于吸食性商品，对片烟外观和感官评吸品质有严格的要求，常规的化学防霉剂对片烟的品吸特性易造成不良影响，易产生残留，应用非常有限。为此，人们研究了密封降氧、辐射防霉、臭氧防霉等技术，均不同程度存在环境安全、影响烟叶醇化和外观品质等问题。近年来，利用植物提取物和微生物代谢产物进行片烟防霉成为研究的热点。利用烟叶表面的有益微生物进行防霉，具有成本低、使用方便、对烟叶影响小等特点。国内报道烟叶生物防霉文献有“陈货发酵期间烤烟叶面微生物活性及其应用研究[J].中国烟草科学，1997，4：13-14.”和“防烟叶霉变菌株对烟叶霉变的影响[J].生命科学研究，2004，8(3)：278-282.”。上述研究表明，烤烟表面有益微生物在仓储烟叶醇化和防霉方面有一定的应用潜力，但对片烟防霉效果以及分离菌株的分类地位等均未作深入研究。

目前，仓储片烟防霉尚无有效方法，在生产中大多通过加强仓储环境的管理(如调节环境温湿度)来避免或减少片烟霉变损失。本发明的发明人在对片烟表面微生物区系开展系统研究的基础上，筛选获得了具有防霉作用、改善片烟品质的优良菌株，在所有已申请的专利文献中均没有涉及本发明主题的文献报道。

发明内容

针对上述现有技术，针对目前片烟仓储过程中防霉的实际问题和需求，本发明筛选出一株抗霉菌活性高、防霉效果好、促进片烟醇化的新型生防细菌菌株，并据此制备出了高效的生物防霉菌剂，可应用于仓储片烟防霉。

本发明的技术方案如下：

本发明分离筛选到的对仓储片烟具有防霉作用的短小芽孢杆菌菌株，经鉴定为，菌株代号为LZ-7，命名为：短小芽孢杆菌Bacillus pumilus，现保存于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心进行保藏，保藏日为2010年8月23日，保藏编号为CGMCC No.4116。

所述菌株对仓储片烟具有防霉作用。实际应用时，可以将其制成微生物制剂，其有效成分为短小芽孢杆菌Bacillus pumilus LZ-7的全培养液培养物或短小芽孢杆菌Bacillus pumilus LZ-7的孢子，或者进一步地，再包括一种或多种制剂学上的载体。

所述微生物制剂的制备工艺为：斜面种→摇瓶种→种子罐→生产罐→压虑→烘培→粉碎→产品(包装剂型为原粉)。

详细实施步骤为：

(1)将本发明的菌株LZ-7斜面试管种接种到肉汤培养基摇瓶中，震荡培养至对数期。

(2)将摇瓶种按种子培养基的体积比12％接种量接种入50L种子罐，培养至对数生长期，种子罐所用的培养剂配方为：玉米粉。

(3)将种子液按生产罐培养基的12％接种量接入生产罐培养，生产罐所用培养基与种子罐培养基相同。

(4)在种子罐和生产罐的培养过程中溶氧量为12％-18％，搅拌速度为200rpm/min，发酵温度为31℃，全流程培养时间为72h，发酵结束后菌体数量达到10¹⁰cfu/mL以上。

(5)发酵完成后，发酵液经过滤直接分装成液体剂型，或烘培成干粉经气流粉碎后分装成固体剂型。