[发明专利]一种用于体外细胞共培养的复合微囊模型

权利要求书

1.一种用于体外细胞共培养的复合微囊模型，其特征在于该模型是以天然多糖海藻酸钠为基质材料，经过两次将多糖海藻酸钠滴入到多价阳离子溶液中凝胶化处理，形成由内外两层海藻酸钠凝胶微球构成的球包球式复合微囊模型，在其中一层凝胶微球中包含或不包含一种细胞，在另一层凝胶微球中包含或不包含另一种细胞。

2.根据权利要求1所述的复合微囊模型，其特征在于所述的多价阳离子是钙、锌、钡、铜、镁、铁、锰离子。

3.根据权利要求1或2所述的复合微囊模型，其特征在于所述的内层凝胶微球的粒径范围在50-600μm，外层凝胶微球的粒径范围在100-3000μm。

4.一种权利要求1所述的复合微囊模型的构建方法，其特征在于包括：

第1、将经过滤灭菌的海藻酸钠溶液滴入到多价阳离子溶液中凝胶化处理，形成海藻酸钠凝胶微球；所述的海藻酸钠溶液中选择性添加或不添加细胞A；

第2、收集凝胶化的海藻酸钠凝胶微球，用生理盐水洗涤，将海藻酸钠凝胶微球再次分散到经过滤灭菌的海藻酸钠溶液中，然后将含有海藻酸钠凝胶微球的海藻酸钠溶液滴入到多价阳离子溶液中再次凝胶化处理，形成球包球式复合微囊模型；所述的海藻酸钠溶液中选择性添加或不添加细胞B；

第3、收集凝胶化处理后的复合微囊模型，生理盐水洗涤，置入细胞培养板内，加入细胞培养基，置于二氧化碳培养箱静置培养。

5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于第1步、第2步中所述的海藻酸钠溶液采用高压静电滴液、气流吹喷滴液或手工注射器滴液的方法滴入到多价阳离子溶液中凝胶化处理，所述的多价阳离子是钙、锌、钡、铜、镁、铁、锰离子。

6.根据权利要求4所述的方法，其特征在于第1步制备内层凝胶微球的海藻酸钠溶液的质量体积浓度为0.5%-5%，制备外层凝胶微球的海藻酸钠溶液的质量体积浓度为0.1%-3%。

7.根据权利要求4所述的方法，其特征在于第1步制备的内层凝胶微球的粒径控制在50-600μm范围，第2步制备的外层凝胶微球的粒径控制在100-3000μm范围。

8.根据权利要求4至7中任一项所述的方法，其特征在于将第1步、第2步凝胶化处理后得到的海藻酸钠凝胶微球表面选择性包覆一层半透性膜，具体方法是：

将生理盐水洗涤后的海藻酸钠凝胶微球分散到质量浓度为0.01%-2%的阳离子型高分子溶液中处理1-30min分钟即可。

9.根据权利要求8所述的方法，其特征在于所述的阳离子型高分子溶液是多聚赖氨酸溶液或壳聚糖溶液。

10.一种权利要求1所述的复合微囊模型的应用，其特征在于用于考察细胞-细胞、细胞-细胞外基质以及细胞-可溶性因子间的相互作用，体外构建肿瘤模型、组织工程化各类组织器官类似物或等同物。