[发明专利]一种肝素钠精品的生产方法

说明书

（一）        技术领域

本发明属于医药领域，特别涉及一种肝素钠精品的生产方法。

（二）        背景技术

肝素钠精品作为天然抗凝血物质受到世界各国的重视，也是我国主要的出口药物之一。随着研究的深入，人们发现肝素钠不但有抗凝、抗血栓形成和调节血脂的作用，还具有抗炎、抗过敏、抗病毒、抗癌等功能。肝素和大多数粘多糖一样，在动物体内多以肝素钠一蛋白质复合物的形式存在，提取过程中由于肝素钠解离不完全使得粗品肝素钠中残留一定数量的蛋白质，需进一步精制才可用于临床。肝素钠的精制过程主要是对粗品肝素钠进行除杂和脱色。目前，我国肝素钠的精制多采用高锰酸钾和过氧化氢两步氧化法或过氧化氢分次加入的二次氧化法生产工艺。但是上述两种工艺都存在不足；第一种工艺的缺点是产品的活性损失大、色泽差、生成的二氧化锰较难滤除，且二氧化锰对肝素钠有部分吸附作用，使产品回收率降低；第二种工艺所得产品色泽较好，目前应用比较广泛，但难以得到高效价的肝素钠精品，原因可能是二次氧化对肝素钠结构造成破坏。

（三）        发明内容

本发明为了弥补现有技术的不足，提供了一种产品回收率高、纯度好的肝素钠精品的生产方法。

本发明是通过如下技术方案实现的：

一种肝素钠精品的生产方法，其特征是：包括如下步骤：

（1）猪胰蛋白水解酶粉的配制；

（2）粗品肝素钠溶液的配制；

（3）酶解法除蛋白；

（4）调酸除蛋白；

（5）氧化处理；

（6）超滤；

（7）沉淀、真空干燥，即得肝素钠精品。

该肝素钠精品的生产方法，其特征是：包括如下步骤：

（1）猪胰蛋白水解酶粉的配制：

（1-1）氢氧化钙溶液的配制：将生石灰与水按1:1-6的比例混合搅匀，沉淀取上清液待用；

（1-2）将新鲜猪胰脏除去结缔组织、油脂、杂质后绞碎成糊状；

（1-3）将沉淀的氢氧化钙溶液与绞碎的猪胰脏糊，按1：1-4的比例混合后，再按混合物总质量的0.1-0.3%加入抑菌剂搅拌均匀；

（1-4）用质量分数为30-40%的氢氧化钠溶液调PH值8-10，经1-6小时活化、浓缩、干燥、粉碎即得可以使用的猪胰蛋白水解酶粉；

（2）粗品肝素钠溶液的配制：

（2-1）配制质量分数为3%的NaCl溶液待用；

（2-2）称取肝素钠粗品与配制好的NaCl溶液，按1:1-9的比例混合溶解，配制成粗品肝素钠溶液；

（2-3）用质量分数为30-40%的氢氧化钠溶液调pH值至8.0静置2小时，过滤除去不溶性杂质，收集过滤液移入反应罐中待用；

（3）酶解法除蛋白：

（3-1）将收集的过滤液用质量分数为30-40%的氢氧化钠溶液调pH值7-9，加热升温至35-45℃，并按溶液总质量的0.02-0.05%的比例加入步骤（1-4）配制好的猪胰蛋白水解酶粉催化裂解，加热升温至45-65℃时停止加热，保温4-6小时；

（3-2）将保温结束的酶解液过滤，收集过滤液，并移入塑钢桶中迅速冷却待用；

（4）调酸除蛋白：

（4-1）将冷却后的酶解液用质量分数为30-40%的Hcl溶液调PH值至1.0-3.0，并在酶解液中加入溶液总质量的0.1-0.3%的亚硫酸氢钠作保护剂，搅拌均匀待用；

（4-2）将调酸后的溶液快速在低温条件下，离心分离除去蛋白，得到无蛋白清液待用；

（5）氧化处理：将收集的无蛋白清液移入氧化罐中，加入质量分数为30%的H₂O₂溶液，用量为溶液总质量的2-3%，用质量分数为30-40%的氢氧化钠溶液调pH值7-9，氧化时间为9-13h，温度为25-35℃，氧化结束后立即过滤，并收集过滤液待用；

（6）超滤：将步骤（5）过滤液经6000-10000分子量的超滤膜进行超滤，收集超滤液待用；

（7）沉淀、真空干燥：将收集的超滤液进行沉淀、真空干燥，即得肝素钠精品。

步骤（1-3）中抑菌剂为苯酚或高锰酸钾。

步骤（3-2）中冷却温度为4-8℃。

步骤（4-2）中低温离心分离是在4-8℃进行离心分离。

在酶解液中加入亚硫酸氢钠作为保护剂，为防止肝素失活。