[发明专利]一种极端环境原油降解功能菌的分离筛选方法无效
| 申请号： | 201110170680.8 | 申请日： | 2011-06-23 |
| 公开（公告）号： | CN102839124A | 公开（公告）日： | 2012-12-26 |
| 发明（设计）人： | 赵东风;刘春爽;张云波;刘其友;李政;吴文华 | 申请（专利权）人： | 中国石油天然气集团公司;中国石油大学（华东） |
| 主分类号： | C12N1/00 | 分类号： | C12N1/00;C12Q1/04 |
| 代理公司： | 北京市中实友知识产权代理有限责任公司 11013 | 代理人： | 赵东冶 |
| 地址： | 100007 北京市*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 极端 环境 原油 降解 功能 分离 筛选 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种极端环境原油降解菌的分离筛选方法，包括如下步骤(一)采用含原油无机盐培养基从极端环境污染土壤中富集原油降解菌；(二)将所得富集菌液梯度稀释后，进行间歇试验考察原油降解情况；(三)采用DGGE技术分析各稀释度菌液的群落组成，从而得原油去除效果与富集菌液相类似、组成最为简单的菌液，即为高效原油降解功能菌，其特征在于具体富集的步骤是将5g克拉玛依地区(高温干旱环境)石油污染土壤放入100m1含10g/L原油的无机盐培养基培养，于45℃，140-170rpm的摇床中进行原油降解菌培养5天后，取富集液5mL接种相同新鲜培养基，相同条件下培养5天，如此连续富集培养3次，将菌液保种于20％甘油中，-80℃低温冰箱保存。
2.根据权利要求1所述的极端环境原油降解菌的分离筛选方法，其特征在于无机盐培养基为：NaHPO40.6g，KH2PO40.2g，NaNO34.0g，CaCl20.01g，FeSO40.01，MgSO40.3g，酵母膏0.5g，蒸馏水1000mL，调节pH至7.2。
3.根据权利要求1所述的极端环境原油降解菌的分离筛选方法，其特征在于梯度稀释是将富集菌液稀释成为10-1、10-3、10-5、10-7、10-9等。
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