[发明专利]复合酶解辅助提取蜂胶中有效成份的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种蜂胶中有效成份的提取方法，特别涉及利用复合酶解辅助提取蜂胶中有效成份的方法。

背景技术

蜂胶是蜜蜂从杨树、桦树、柳树以及针叶树等胶原植物的皮或者嫩芽中采集的树脂和汁液，与蜜蜂本身的喉腺分泌物混合而成。黄酮类化合物是蜂胶的主要营养成分，蜂胶黄酮具有广泛的生物学活性，如抗氧化、抗肿瘤、抗炎症和调节免疫细胞等效应。蜂胶经过提纯后得到的蜂胶膏一般含有30％的黄酮类化合物，其中含有比较多的黄酮糖苷类化合物。而研究结果表明，黄酮苷元清除人体氧自由基的生物活性明显优于黄酮糖苷，黄酮苷元的效价是黄酮糖苷效价的7倍。蜂胶中黄酮苷元的化学成份为杨梅黄酮、槲皮素、芹菜素、松属素等。黄酮苷元的生物活性之所以大大优于黄酮糖苷，是因为黄酮类化合物在动物体内代谢时，仅有苷元型黄酮可以直接被吸收进入动物血液中，而大部分糖苷型的黄酮化合物在人体内不能通过小肠壁进入到血液中，而是被肠腔内微生物通过杂环裂解方式降解和代谢，其中仅有小部分黄酮在结肠内益生菌分泌的水解酶作用下，产生苷元再重新吸收进入血液。黄酮糖苷在动物体内的生物利用率远远低于苷元型黄酮，黄酮苷类物质在人体内的利用率很低，抗氧化活性也是得不到保证。因此，改善黄酮的构型、提高其在血液中的吸收率是提高黄酮类产物生物利用率的重要途径。改变黄酮苷糖体的构型，主要有化学转化法和生物转化法。目前，国内外大多采用化学法水解黄酮糖苷，通过黄酮的醚化、酯化、酰基化等化学衍生化反应，以改变黄酮的特性，如提高脂溶性，但是这些反应程往往屏蔽了黄酮类化合物的主要功能团一酚羟基，对抗氧化作用产生不利影响，且加工中容易产生环境污染。

现在蜂胶产业化的提取产方法主要是乙醇提取和超临界CO2萃取，这两种提取方法所提取的蜂胶黄酮类化合物大都是黄酮糖苷类化合物，没有对其进行分子结构的修饰，因此通过现有技术提取的蜂胶的营养成份仍然是人体利用率较低的黄酮苷类物质。

发明内容

发明目的：本发明的目的是提供一种可以提高蜂胶中有效成份的生物活性和有效成份品质的、反应温和、经济环保、反应具有高度的专一性和选择性的利用复合酶解辅助提取蜂胶中营养成份的方法。

技术方案：1、一种复合酶解辅助提取蜂胶中有效成份的方法，所述提取方法包括以下步骤：

a)毛胶的预处理：毛胶经预选分级，去除杂质，放入冷藏柜，进行冷冻；

b)将冷冻后的毛胶进行粉碎成颗粒，对粉碎后的颗粒进行筛选，对大于20目的颗粒返回冷藏柜；

c)将破碎筛选后的毛胶颗粒与一定配比的水和复合酶的混合液混合，将混合原料铺在生物酶解床上，调节好相应的温湿度、PH值，进行生物酶解反应；

d)酶解过程始终保持原料的均匀，酶解完成后将原料放入浸提釜，加无水乙醇使其浓度达到75％，使酶灭活，同时进行乙醇提取；

e)在常温下常压浸提24-48h；并正反方向不断搅拌，24-48h后，停止搅拌；静置24-48h，放出上清液经200目与500两次过滤，滤液进入储罐；再次加95％乙醇如上述工艺重复2次，上清液与渣的离心液再经两次过滤，最后合并滤液；浸渍过程中温度应保持在25-30℃左右，温度过低溶解度降低导致时间延长，溶剂用量加大；

f)滤液进入减压蒸发器，采用水浴加热；浓缩温度40-50℃，真空度0.096以上；

g)蒸发出的乙醇蒸气经冷凝器回收注入溶剂回收罐，循环使用。

h)蒸发后的蜂胶注模成型。

所述复合酶为：β-鼠李糖苷酶、β-葡萄糖苷酶、木聚糖酶、果胶酶、α-淀粉酶；各种酶解参数如下：β-鼠李糖苷酶50-100IU/mg、β-葡萄糖苷酶50-100IU/mg、木聚糖酶1000-2000IU/mg、果胶酶20-50IU/mg、α-淀粉酶10-50IU/mg，加酶总量0.5-1.5％，酶解温度50-60℃，酶解湿度30-50％，酶解pH 3.5-5.0，酶解时间12-24h。

所述浸提釜选用配回流冷凝器的反应釜，乙醇提取时加入乙醇的比例为：按照重量酶解后毛胶与95％的乙醇比例为1∶4到1∶8之间。

有益效果：本发明与现有技术相比，其显著优点是：1、将酶解蜂胶技术与醇提蜂胶技术相结合运用到生产实际中，工艺简单，工艺参数范围准确，易实现产业化；2、所提取蜂胶的营养成份中提高了杨梅黄酮、槲皮素、芹菜素、松属素等黄酮苷元的含量；3、可以明显提高蜂胶酶解产物的抗氧化活性。

具体实施方式

下面结合具体实例对本发明作进一步说明，但本发明并不仅限于以下实例。

实例1