[发明专利]可用于治疗人或动物免疫相关性疾病的白介素-4治疗性疫苗

说明书

技术领域

本发明涉及可用于治疗人或动物免疫相关性疾病的白介素-4治疗性疫苗。

背景技术

到目前为止，人们对细胞内寄生的病原体(病毒、细菌、寄生虫等)所引起的慢性传染病仍缺乏比较有效的治疗办法，疫苗预防效果也不理想。从理论上讲，这类慢性传染病需要宿主产生坚强的一类(Th1)抗感染免疫反应才能清除病原体，但如何诱导机体产生坚强的Th1抗感染免疫反应仍然是个难题。根据申请人长期的探索研究发现，这类慢性传染病的临床发病阶段大多数都表现为很强的二类(Th2)抗感染免疫反应，即以Th2抗感染免疫反应为主；而亚临床感染则大多数都表现为很强的Th1抗感染免疫反应，即以Th1抗感染免疫反应为主。进一步的研究证明，一类和二类免疫反应的产生并不是同步发生的，相辅相成的形式，而是相互抑制的，此起彼伏的形式。IL-4是诱导产生Th2免疫反应的主要细胞因子，如果能降低宿主体内IL-4的含量，即可有效的抑制Th2免疫反应，从而促进Th1免疫反应的发生。实验证明，给宿主注射抗IL-4抗体即可达到此目的。但由于抗体的半衰期较短(IgG的半衰期约21-28天)，需要反复多次注射，不但提高了成本，而且易引起过敏反应。急需一种成本低廉、且不会引起过敏反应的技术手段。

发明内容

针对上述现有技术，本发明提供了一类制备简单、成本低廉、且安全可靠的可用于治疗人或动物免疫相关性疾病的白介素-4治疗性疫苗。

本发明是通过以下技术方案实现的：

可用于治疗人或动物免疫相关性疾病的白介素-4治疗性疫苗，是以白介素-4的天然或人工合成的完整蛋白或蛋白片段(多肽或寡肽，在做疫苗前需进一步与其它抗原大分子相偶联)做抗原制成的任何形式的蛋白疫苗或偶联蛋白疫苗；

或：以白介素-4的完整基因或基因片段做抗原基因或主要抗原基因制成的任何形式的基因疫苗或融合基因疫苗；

或：以任何载体克隆IL-4的完整基因或基因片段、以任何表达系统扩增基因所制的基因疫苗，或表达IL-4的完整蛋白或蛋白片段(多肽或寡肽)做抗原制成的任何形式的蛋白疫苗或融合蛋白疫苗；如果所选择的表达载体属于活载体，也可做成活载体基因工程疫苗。

所述疫苗中可添加有医学上常规的疫苗佐剂。

本发明的疫苗不但可用于治疗人或动物的慢性传染病和寄生虫病，还可进一步推广应用到癌症、某些类型的过敏反应等与免疫相关的疾病治疗中去。

根据所制备的疫苗形式不同，本发明的疫苗的实施方式可有多种：如铝胶佐剂、油佐剂、脂质体佐剂等疫苗，可采用皮下注射、皮内注射和肌肉注射等多种不同方式；如果是活载体疫苗，除了以上注射方式外，还可采用口服、吸入、滴鼻、滴眼等不同方式。

本发明是针对现有技术中存在的缺陷：“给宿主注射抗IL-4抗体，需要反复多次注射，不但提高了成本，而且易引起过敏反应”，而提出的技术方案，即：采用IL-4疫苗的形式对宿主进行主动免疫治疗，一般，首次免疫即可达到约2～3个月的有效时间，二次免疫即可达到约半年的有效治疗时间，经过1～3次的免疫治疗，即可达到康复的目的。与直接应用抗IL-4抗体治疗相比，有应用次数少，用量低等特点，这样，不但大大降低了治疗成本，而且，大大降低了产生过敏反应的可能性。

附图说明

图1：给实验BALB/c小鼠分别于诱导过敏反应前3周和1周皮下(s.c.)接种实施例1所制备的(见下面实施例1)IL-4基因重组油佐剂疫苗，另设pET-32载体油佐剂疫苗和生理盐水免疫对照组。于第0周和第3周分别用低剂量(5μg)鸡卵清白蛋白(OVA)铝胶疫苗腹腔接种，以致敏小鼠，于第5周用高剂量(80μg，溶解在50μl PBS中)OVA由鼻孔滴入，以诱导产生过敏反应。结果显示：IL-4基因重组油佐剂疫苗免疫组与pET-32载体油佐剂疫苗组和生理盐水免疫对照组相比，IL-4基因重组油佐剂疫苗可显著降低OVA-IgE特异性抗体的产生。

图2：给实验BALB/c小鼠分别于利什曼寄生虫接种前3周和1周腹腔(i.p.)接种实施例1所制备的(见下面实施例1)IL-4基因重组铝胶疫苗，另设pET-32载体铝胶疫苗和生理盐水免疫对照组。适量利什曼寄生虫皮下(s.c.)注射接种于小鼠后肢足垫。接种后每周用卡尺测量一次足垫处的病变大小，持续8～10周。结果表明，IL-4基因重组疫苗能够显著降低利什曼寄生虫的感染。

具体实施方式

下面结合实施例对本发明作进一步的说明。

实施例1：小鼠IL-4基因重组疫苗的构建与疫苗制备